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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
HNF1 Luciferase Reporter Plasmid
- 库存:
244
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1μg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测
英文名:HNF1 Luciferase Reporter Plasmid
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SY0130
规格:1μg
HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒(HNF1 luciferase reporter plasmid)是用于检测HNF1转录活性水平为目的的报告基因。HNF1((hepatocyte nuclear factor 1)是HNFs家族的主要成员之一,是调控肝功能基因表达的重要转录因子,对促进肝脏发育和维护肝细胞生物学功能发挥重要作用。
HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Hepatocyte Nuclear Factor 1信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMHNF1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个HNF1结合位点,可以高灵敏度地检测HNF1的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得HNF1报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

使用说明
pGMHNF1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
关于HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
ARB10652 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(TIe1)Elisa方法检测 Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and egf-like domains 1,tie1 ELISA KIT
ARB13904 猪血管生成素1(ANG-1)酶标法分析 Porcine angiopoietin 1,ang-1 ELISA KIT
BTN131072 预稀释BSA蛋白标准品 Instant BSA Standard
磷酸锂 3-(2-Aminoethylamino)propyldimethoxymethylsilane 10377-52-3
PY06-012 Rambach琼脂 1000ml,用于沙门氏菌及部分肠杆菌科细菌的快速分离与鉴别
吡啶盐酸盐 MBHA resin 628-13-7
L-高苯丙氨酸 Ticarcillin disodium salt 943-73-7
CYB163071 Avidin-FITC(订制)
F030431 胶体金标记兔抗绵羊IgG抗体 Rabbit Anti-Sheep IgG*GOLD
F030806 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*BIOTIN
ARB13685 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa分析 Rabbit angiotension Ⅱ,ang-Ⅱ ELISA KIT
HC0261 Eppendorf大容量电动移液器
F030637 FITC标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
BTN80601 非冻型细菌RNA保存液 Bacterial RNALOCKER
ARB11043 人环磷酸鸟苷(cGMP)含量检测 Human cyclic guanosine monophosphate,cgmp ELISA KIT
HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测关键词:SY0130,HNF1 Luciferase Reporter Plasmid,HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒
·硫酸链霉素
编号:SY0530
英文名称:Streptomycin Sulfate
规格:100g
硫酸链霉素为一种氨基糖苷类抗生素,作用于革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。主要与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成。
英文名称:Streptomycin Sulfate
CAS No:3810-74-0
分子量:1457.38
分子式:(C21H39N7O12)2·3H2SO4
级别:USP
溶解性:溶于水(50 mg/ml),使用时需过滤除菌
储存条件:2-8℃
·50×TAE缓冲液
编号:SY0263
英文名称:50×TAE Buffer
规格:250ml
TAE即Tris acetate-EDTA buffer,常用于琼脂糖和聚丙烯酰胺核酸的电泳实验。可用作电泳以及凝胶配制缓冲液。本品是50倍浓缩的TAE,使用时需用去离子水稀释到1×TAE工作液即可。
产品组分
1×TAE工作液中含有40 mM Tris-Acetate和1 mM EDTA,pH 8.3。
·SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
编号:SY0359
英文名称:SDS-PAGE Gel Preparation Kit
规格:30~50gels
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶,大大简化了制胶过程,本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。
产品组份:
| 组分名称 | 规格 | 保存方式 |
| 30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1 | 100ml | 4℃避光 |
| 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液,pH8.8 | 70ml | 4℃ |
| 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8 | 30ml | 4℃ |
| APS 过硫酸铵 | 0.5g | 4℃~25℃ |
| TEMED 四甲基二乙胺 | 0.5ml | 4℃~25℃避光 |
储存条件:4~25℃,有效期6个月。
注意事项
1) 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒,请适当防护。
2) APS溶液不稳定,当配制成10%溶液后,分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间,以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长,需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
3) TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。
4) 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下,可通过适当调节TEMED以及APS的用量,控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
5) 温度较低时,4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
6) 凝胶配制过程,特别是液体混匀步骤,需尽量避免气泡的产生。
7) 在分离胶上层进行水压时需小心操作,加水速度不宜过快。
8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1.根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】;
2.按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶,制胶程序如下:
2.1 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
2.2 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免气泡产生;
2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液,对于mini胶,分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,从而压平凝胶表面;
2.4 静置30-60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面,表面凝胶已聚合;
3.按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶,制胶程序如下:
3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。
3.2 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
3.3 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
3.5 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.6 静置10-20min,等待浓缩胶聚合。
3.7 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】,然后进行上样和后续的常规电泳操作。
附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%凝胶 | 50-150kD |
| 8%凝胶 | 30-90kD |
| 10%凝胶 | 20-80kD |
| 12%凝胶 | 12-60kD |
| 15%凝胶 | 10- 40kD |
附表2. 不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
| 分离胶浓度 | 凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 分离胶缓冲液,pH 8.8 |
10%APS | TEMED | ||
| rowspan=6>6% | 5 | 2.7 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10 | 5.4 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15 | 8.1 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20 | 10.8 | 4.0 | 5.0 | 0.2 | 0.016 | |
| 30 | 16.2 | 6.0 | 7.5 | 0 .3 |
0.024 | |
| 50 | 27.0 | 10.0 | 12.5 | 0.5 | 0.040 | |
| rowspan=6>8% | 5 | 2.37 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10 | 4.7 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15 | 7.1 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20 | 9.5 | 5.3 | 5.0 | 0.2 | 0.012 | |
| 30 | 14.2 | 8.0 | 7.5 | 0.3 |
0.018 | |
| 50 | 23.7 | 13.3 | 12.5 | 0.5 | 0.030 | |
| rowspan=6>10% | 5 | 2.03 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 4.07 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 6.1 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 8.1 | 6.7 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 12.2 | 10.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
| 50 | 20.3 | 16.7 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| rowspan=6>12% | 5 | 1.7 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 3.4 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 5.1 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 6.8 | 8.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 10.2 | 12.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
| 50 | 17.0 | 20.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| rowspan=6>15% | 5 | 1.2 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 2.4 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 3.6 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 4.8 | 10.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 7.2 | 15.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
| 50 | 12.0 | 25.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
附表3. 5%SDS-PAGE浓缩胶配制体系
| 凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 浓缩胶缓冲液,pH 6.8 |
10%APS | TEMED | |
| 2 | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4 | 2.28 | 0.68 | 1.0 | 0.04 | 0.004 |
| 6 | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8 | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测关键词:SY0130,HNF1 Luciferase Reporter Plasmid,HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒
·VDR萤火虫荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0060
英文名称:VDR(Vitamin D Receptor) luciferase reporter plasmid
规格:1μg
VDR-Luc荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(VDR luciferase reporter plasmid)用于检测VDR转录活性水平为目的的报告基因。VDR(Vitamin D Receptor)在本质上是类固醇受体超家族的成员之一。它在维持机体钙、磷代谢,调节细胞增殖、分化等方面起重要作用,已成为近年骨和内发泌学领域研究的焦点。
VDR报告基因主要应用于检测细胞中VDR的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMVDR-Lu是改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个VDR结合位点,可以高灵敏度地检测VDR的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得VDR报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMVDR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
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文献和实验【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题?
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒,但是我不知道两种质粒间的比例是多少,有哪位前辈做过这方面实验的,请帮我指点一下,谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL-TK(海蜃素荧光素酶)的荧光值要高一些,我转20ng/孔(24孔板),作为内参.pGL3(萤火虫荧光素酶)的荧光值低一些,我转0.4ug/孔(24孔板)然后0.4ug的调整质粒。这样的话,萤火虫荧光素酶
【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
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