北京细胞增殖与示踪检测试剂盒大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京细胞增殖与示踪检测试剂盒大量库存促销是高品质的细胞凋亡与增殖产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细胞增殖与示踪检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京细胞增殖与示踪检测试剂盒大量库存促销
规格：500T
编号：SY0509
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE对细胞进行示踪及增殖检测的试剂盒，由CFDA,SE粉末、溶剂及相关细胞染色缓冲液组成，该试剂盒主要工作原理为：CFDA, SE具有细胞膜渗透性，本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后，可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可发强烈的绿色荧光，不能穿透细胞膜，能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的*基结合从而偶联到细胞蛋白质上，同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内，被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数月，因此非常适用于细胞群落分析。

CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一，优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1通道）根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次（1/2的荧光强度），二次（1/4的荧光强度），三次（1/8的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFSA，SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可用于成纤维细胞，自然杀伤细胞，造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。

CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式细胞仪检测细胞增殖外，还可用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。

本品为CFDA，SE细胞增殖与示踪检测试剂盒，包含配制CFDA，SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液，简化了实验前期准备工作。另，CFDA,SE标记细胞一般15min即可完成，对于不同细胞，需要自行摸索最佳标记时间。按照每个样本的标记体积为2ml计算。

注意事项
1）CFDA,SE易被水解，在水溶液中会很快变质。因此保存过程中粉末或者储存液都需干燥保存；而且使用过程中避免接触水。但在标记细胞的过程中和水接触是在许可范围内的。
2）CFDA,SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，于20-25℃水浴温育片刻至全部融解后方可使用。
3）不同的细胞其细胞内酯酶活性不同，因此染色效果具有差异性。
4）虽然本试剂盒已对CFDA,SE染色体系做了优化处理，但建议使用者根据自身的细胞类型，培养条件以及应用的不同来梯度摸索最佳的工作浓度，以最低浓度得到适宜的标记效率为准。
5）荧光染料均存在淬灭问题，染色过程需尽量避光。
6）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃，有效期1年

北京细胞增殖与示踪检测试剂盒大量库存促销正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·2×RNA上样缓冲液(不含*化乙锭)
编号：SY0254
英文名称：2×RNA Loading Buffer(Without Ethidium Bromide)
规格：5×1ml
2×RNA上样缓冲液用于琼脂糖凝胶电泳或聚丙*(代"烯")酰胺琼脂糖凝胶电泳前RNA 样本的处理。缓冲液组分经过优化，其中包括指示剂*酚蓝和二甲*青FF，电泳时可肉眼监控RNA 的迁移，并含有甲酰胺用作一种变性剂和RNA稳定剂。

1×RNA loading buffer各组分：47.5% Formamide, 0.01%(w/v)SDS, 0.01%(w/v) Bromphenol Blue, 0.005%(w/v) Xylene Cyanol, 0.5mM EDTA.

使用方法
1）将RNA样品与等体积的2×RNA上样缓冲液充分混匀。
2）对于变性PAGE(尿素)/Agarose凝胶电泳，需在65-70℃加热5-10min变性RNA，并在加热的同时用枪头吸取电泳缓冲液小心冲洗点样孔中多余的尿素；对于非变性PAGE/Agarose凝胶电泳则无需此步加热，直接进行下一步。
3）上样即可。

保存：室温可稳定保存1周，4 ºC可保存1个月，-20 ºC可稳定保存2年。

·腔肠素e
编号：SY0241
英文名称：Coelenterazine e
规格：1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素e（Coelenterazine e），一种天然腔肠素衍生物，结构上比天然腔肠素多了一个乙基。作为海肾荧光素酶的底物，其荧光强度是天然腔肠素的137%。腔肠素e具有最高的体外水母发光蛋白反应性，且具有双发射峰（405& 465），从而可在pCa 5-7范围内通过双波长的比例测定Ca2+浓度，由于该法不依赖于腔肠素浓度，因此提高了检测精确性。但对于细胞内相关实验则无此优势，因为该衍生物的细胞通透性较差。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：e-CTZ; e Coelenterazine
CAS：114496-02-5
分子式：C28H23N2O3
分子量：449.5
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不溶于DMSO
外观：黄色至橘色固体
纯度：≥95%（TLC）
结构：


注意事项
1） 腔肠素e粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成腔肠素e氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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ARB13925 猪表皮生长因子(EGF)Elisa方法检测 Porcine epithelial growth factor,egf ELISA KIT
PY02-421  UVM培养基  100克  
ARB13557 兔子内皮型一氧化*(代"氮")合成酶3(eNOS-3)代做ELISA实验 Rabbit endothelial nitric oxide synthase 3,enos-3 ELISA KIT
CBZ-L-精*酸 Acriflavine 1234-35-1
ARB11327 人胆囊收缩素(CCK)血清中含量检测 Human cholecystokinin,cck ELISA KIT
甲基绿指示剂   100ml
ARB13239 小鼠维生素C(VC)含量分析 Mouse vitamin c,vc ELISA KIT
ARB10520 人白细胞介素8(IL-8)ELISA代测服务 Human interleukin 8,IL-8ELISA KIT
ARB13634 兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)免费代测 Rabbit insulin-like growth factor 2,igf-2 ELISA KIT
ARB12678 大鼠睾酮(T)酶联免疫定量检测 Rat testoterone,t ELISA KIT
002019 肝素*抗凝牛血
ARB13072 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体I(TNFsR-I)Elisa分析 Mouse tumor necrosis factor soluble receptor i,tnfsr-i ELISA KIT
SJ0252 EDC HCl碳二酰亚胺盐*(代"酸")盐
ARB14240 人CD44分子(CD44)ELISA检测服务 
ARB13043 小鼠层连蛋白/板层素(LN)含量分析 Mouse laminin,ln ELISA KIT
ARB12290 大鼠抗心肌抗体(AMA)Elisa定量检测 Rat anti-myocardial antibody,ama ELISA KIT
SJ0855 猪血清
ARB10348 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)酶标法分析 Human secretory leukocyte protease inhibitor,slpi ELISA KIT
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·定点突变试剂盒
编号：SY0020
英文名称：Site-Directed Mutagenesis Kit
规格：10 rxn
使用本试剂盒，目标质粒扩增产物经DpnI消化、重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成： Pfu DNA Polymerase扩增模块和快速克隆模块。Pfu DNA Polymerase超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性，其卓越的长片段扩增能力，广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。快速克隆系统利用高效的同源重组反应替代传统的退火成环反应。因此使用本品进行DNA定点突变时，引物设计更加灵活，且扩增反应不再需要以线性方式进行，极大减少了模板使用量，有利于原始甲基化模板的彻底降解。可以高效完成两个PCR产物的无缝拼接，因此该试剂盒还能以单次扩增的方式对目标质粒上不连续的两个位点同时进行突变。

本试剂盒中的重组酶Exnase经过优化，专门针对单碱基、不连续双碱基定点突变。此外，如扩增产物特异，其DpnI消化产物可不进行DNA纯化而直接用于重组反应。高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及极高的成功率，使得本产品成为DNA定点突变首选试剂盒。

应用范围：DNA定点突变
【注】：如使用本品对质粒进行定点突变，请使用甲基化酶无缺陷的宿主菌 (例如Top10、DH5α、JM109)扩增原始质粒！

储存条件：-20℃，有效期一年。

·pUM19-T Vector TA克隆载体
编号：SY0295
英文名称：Site-Directed Mutagenesis Kit
规格：1μg
pUM19-T载体是一种用于PCR产物高效克隆（TA Cloning）的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上，在两侧的3’端添加碱基T而制成。经特殊工艺改造后，使其具有较高的克隆效率：

1）特殊的纯化方式使得超过99% 的pUM19载体两端都具有3’-T突出端，因此极大的降低了载体自连率。
2）由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A，可与pUM19载体3’ 端的T互补连接，因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。
3）pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内，可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。

产品组份：
pUM19-T Vector (50 ng/μl)————20 μl
500 bp control insert (50 ng/μl)————20 μl

使用说明
1. 将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存，每次取一支使用。
2. 按下表配制连接反应体系：

 

ddH2O	To 10 μl
10×Ligase Buffer	1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)	1μl (约0.025 pmol)
插入片段*	0.075 pmol～0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)	1 μl

注：插入片段与载体的摩尔比应在3:1～10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度，并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3. 对照反应体系（可选）：

ddH2O	6 μl
10×Ligase Buffer	1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)	1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)	1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)	1 μl

4. 轻轻吹打混匀反应体系，室温22-26℃孵育1-2小时，或16℃过夜。
5. 转化：
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6)，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴，不要晃动，准确热激90s后，立刻置于冰水浴中，不要晃动，静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀，室温正置10min。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
【注】：如果使用超级感受态细胞（转化效率>108 cfu/μg），可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。

注意事项
1) 尽量避免反复冻融，可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 连接使用的PCR 片段3’ 端应带有A 末端；Pfu DNA Polymerase (SY0036)等高保真聚合酶的扩增产物不带A，应先在其末端加A后再进行TA克隆。
3) 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

附1：pUM19-T 载体结构


储存条件：-20℃。

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