北京ATF1-GF报告基因质粒现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京ATF1-GF报告基因质粒现货是高品质的报告基因检测产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多ATF1-GF报告基因质粒等报告基因检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京ATF1-GF报告基因质粒现货
规格：1μg
品牌：百奥莱博
编号：SY0207
产地：国产|进口
ATF1-GFP报告基因是用于检测ATF1转录活性水平为目的的报告基因。ATF1(Cyclic AMP-dependent transcription factor)是一种活化转录因子，主要通过上调和下调靶基因来影响细胞的生理活动，如细胞的生长和存活等。

ATF1-GFP报告基因主要应用于cAMP/PKA信号通路研究、药物筛选、基因调控和功能的研究等。

pGMATF1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ATF1结合位点，可以高效地检测ATF1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ATF1-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ATF1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMATF1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

北京ATF1-GF报告基因质粒现货极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·支原体去除试剂(2000×)
编号：SY0548
英文名称：Treatment (2000×)-Mycoplasma Elimination Reagent
规格：1ml
在细胞培养过程中，支原体污染常有发生，但由于其特殊性很难被肉眼和显微设备检测到，因此做好支原体的预防工作显得尤为重要。可通过向培养基中添加支原体预防试剂，来有效预防支原体的污染。

由于支原体无细胞壁，传统的抗生素一般对其无效，而本产品结合了常用的对支原体具有抑菌作用的抗生素，经优化配比制备成混合制剂，其核心成分是喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗生素。本产品在支原体去除试剂的基础上，对三种抗生素的浓度进行了进一步优化，确保在抑制支原体生长的同时，不会对细胞造成伤害。本品为2000×母液，使用时需稀释至1×工作液浓度，具体使用方法与细胞培养过程中添加双抗的方法一致。

储存条件：-20℃避光，保质期18个月

·细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒
编号：SY0327
英文名称：Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit
规格：50T
细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒用于快速便捷分离细胞/组织细胞膜和细胞浆蛋白，抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的蛋白，也包括线粒体膜、内质网膜以及高尔基体膜等上的膜蛋白。主要工作原理：通过匀浆适度破碎细胞，经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀，随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清，然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。整个过程仅需约90min即可完成，抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE，Western、酶活性测定等后续实验。

膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等，后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定，但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。

按照说明书步骤的用量（细胞2-5×107个；组织约100mg），SY0327可分别进行50个样品的抽提，具体用量可根据不同的样品体积进行调整。

试剂盒组份：
试剂A：50ml
试剂B：15ml

储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项
1）客户需自备PMSF，PMSF需现配现用，建议在抽提试剂加入到样品前2-3min加入，以防失效。
2）利用本试剂盒抽提到的细胞膜/细胞浆蛋白可直接用BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)（Yeasen Cat#20201）测定其浓度，但不适合用Bradford法测定。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
室温融解并混匀试剂A和B，融解后立即置于冰上。取适量的试剂A和B备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使其最终浓度为1mM。

1 样品准备
1）细胞样品
① 细胞收集
贴壁细胞：培养细胞约2-5×107个，PBS清洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
【注】：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的膜蛋白。
悬浮细胞：培养细胞约2-5×107个，离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
② 细胞清洗
用适量冰浴预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞4℃，600g离心5min沉淀细胞。弃上清，随后4℃，600g离心1min，以沉淀离心管管壁上的残留液体并进一步沉淀细胞，尽最大努力吸尽残留液体。
③ 细胞预处理：把1ml试剂A(含PMSF)加入至上述细胞中，轻轻并充分悬浮细胞，冰浴放置10-15min。
2）组织样品
取约100mg组织，用剪刀尽量小心剪切成细小的组织碎片。加入1ml试剂A(含PMSF)，轻轻悬浮组织碎片，冰浴放置10-15min。【注】：如果组织样品比较少，也可以使用更少的组织量，例如30-50mg，后续试剂的用量及操作步骤不变；组织用量较少时，最后获得的膜蛋白也较少。

2 样品的破碎及破碎效果的鉴定
① 样品匀浆：把细胞悬液或组织样品转移到一适当大小的冰浴预冷玻璃匀浆器中，匀浆约30-50下。【匀浆效果与细胞类型和组织类型相关，不同细胞或组织所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。】
② 通常在匀浆30次后取约2-3µl匀浆液滴在盖玻片上并在显微镜下观察，如见细胞核周晕环(A shiny ring around the nuclei)或完整的细胞形态，说明细胞仍完整。如果有70-80%的细胞均无核周晕环和完整细胞形态，说明细胞已经充分破碎，则进行下一步实验。否则，重新匀浆10-30次直到细胞至少70%已经破碎。同时记录对于该细胞的匀浆次数，通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。另外需注意特定的匀浆次数和匀浆器也有关，需同时注意记录使用的是哪一个匀浆器。
【注】：如果没有适当的玻璃匀浆器，对于培养的细胞也可以采用反复冻融法来破碎细胞。把样品在液氮和室温依次反复冻融两次，然后取少量样品在显微镜下检测细胞破碎的程度。如果细胞破碎的程度不足70%，可增加冻融次数，直到细胞破碎的程度大于70%。

3 去除细胞核和未破碎的细胞
在4℃，700g离心10min，小心收集上清液至一新的离心管中。【注】：吸取上清时切勿接触沉淀！可以有约30-50µl上清液残留不予吸取，以保证吸取的上清液有较高的纯度。

4 沉淀细胞膜碎片
在4℃，14000g离心30min，以沉淀细胞膜碎片。

5 收集细胞浆蛋白
吸取上清至1新的离心管中，即为细胞浆蛋白，可-70℃保存备用。吸取上清时可以有30-50µl上清残留，以避免接触沉淀导致上清样品被污染。

6 抽提膜蛋白

4℃，14000g离心10sec，尽最大努力吸尽上清。可以轻轻触碰到沉淀，甚至吸走很少量的沉淀。加入试剂B 200µl(如有必要，也可加大到300µl)，最高速剧烈Vortex 5sec重悬沉淀，冰浴5-10min。重复前述步骤的vortex和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。随后，4℃，14000g离心5min，收集上清即为细胞膜蛋白溶液。可-70℃保存备用。对于一些有特殊用途的膜蛋白，可自行配制适当的膜蛋白抽提试剂进行膜蛋白抽提。


北京ATF1-GF报告基因质粒现货关键词：ATF1-GF报告基因质粒,ATF1 GFP Reporter Plasmid,SY0207


·40%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺，37.5:1
编号：SY0341
英文名称：40% Acryl/Bis Solution, 37.5:1
规格：500ml
Acr-Bis常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺（N，N’-methylene bisacrylamide，简称Bis ）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度（交叉连接的程度）所决定。

聚合链的长度与丙*(代"烯")酰胺的浓度有关，交联度由Acr 与Bis的相对比例决定，调节单体丙*(代"烯")酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低，凝胶的孔径愈大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度愈高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。

40% Acr-Bis(19:1)即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
40% Acr-Bis(29:1)即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
40% Acr-Bis(37.5:1)即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。

储存条件：4℃,避光


北京ATF1-GF报告基因质粒现货关键词：ATF1-GF报告基因质粒,ATF1 GFP Reporter Plasmid,SY0207

F030218 HRP标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*HRP
ARB10136 人PL12抗体/抗丙*酰tRNA合成酶(PL12/AlARS)检测服务 Human anti-pl12-antibody,pl12/alars ELISA KIT
BL1233 7.5% BSA溶液(细胞培养级)
BL0918 RBITC标记羊抗人IgG抗体
ARB11539 人高敏三碘甲状腺原*酸(u-T3)代做ELISA实验 Human ultrasensitivity tri-iodothyronine,u-t3 ELISA KIT
ARB13678 兔血清总补体(CH50)Elisa定量检测 Rabbit 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
BL1322 dATP(100mM)
BTN60208 硫*(代"酸")卡那霉素溶液 Kanamycin Sulfate Solution
邻羟基苄醇 (+)-Biotin hydrazide 579-07-7
KH水溶液(1mol/L)  1mol/L|10% 100ml|500ml
1119-34-2 L-Arginine  HCL  L-精*酸盐*(代"酸")盐
F020201 山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG
ARB11775 人解整合素样金属蛋白酶33(ADAM33)检测服务 
ARB10859 人抗突触前膜抗体(PsmAb)含量检测 Human anti-presynaptic membrane antibody,psmab ELISA KIT
BL1419 膜封闭液

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