北京现货碱性磷酸酶活性检测试剂盒供应

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名称：北京现货碱性磷酸酶活性检测试剂盒供应
编号：SY0467
产地：国产|进口
规格：100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒，可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照，可进行达100个样品的检测。

碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，简写为ALP或AKP），又称碱性磷酸酯酶，是一组同工酶，目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织，是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解，从而将底物分子上的磷酸基团去除，转化为羟基。此类底物包括核酸（DNA、RNA）、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等；生物学中碱性磷酸酶（ALP）水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标，如：1）作为iPS成功诱导的标志；ALP在大多数细胞类型中均有表达，但是在iPS细胞内的表达水平明显升高；2）结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标；3）血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症，常被认为和恶性胆管阻塞，原发性硬化胆管炎，肝癌，肝硬化等肝胆疾病密切相关；4）血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成，以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关；5）碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况，多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说，血清内ALP的范围为40-150U/L。

对硝基*(代"*")磷酸（p-nitrophenyl phosphate, pNPP）是一种常用的磷酸酶显色底物，碱性条件下，可在ALP作用下生成对硝基*(代"*")酚（p-nitrophenol, pNP），后者在碱性环境下呈黄色产物，并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深，说明ALP活性越高，反之则活性越低。因此，通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。

产品规格：

 

ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer	15ml	-20℃
显色底物 pNPP Substrate	2管	-20℃避光
pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard	100ul (10mM)	-20℃避光
反应终止液 Stop Solution	12ml	-20℃

储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项
1） 如果进行酶活力的绝对定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐孵育30min等较长时间，以减小操作过程中的时间误差。如果样品中酶活性较高，则可以预先适当稀释样品。
2）样品溶液中须避免出现EDTA、*离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶抑制剂。
3）ALP反应缓冲液和p-nitrophenol标准品溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性，请小心操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 试剂准备
将所有试剂取出，恢复至室温使用。
1） 显色底物溶液：取一管显色底物，溶解于2.5ml的ALP反应缓冲液中，充分溶解和混匀，冰上放置。注意：新鲜配制的显色底物溶液需在数小时（≤ 6h）内使用。
2） 标准品工作液：取10μl p-nitrophenol标准品溶液(10mM)，用ALP反应缓冲液稀释至0.2ml，使得终浓度为0.5mM。

2．样品准备
1） 细胞或组织裂解液的准备：采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞和组织，如果有必要需进行适当匀浆，随后离心取上清，用于ALP活性的检测。注意：裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
2） 血浆、血清和尿液的准备：血浆和血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。注意：血浆制备不能用含EDTA和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
3） 样品的稀释：若样品中含有较高活性的ALP，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂盒中的ALP反应缓冲液进行稀释。若使用上述反应缓冲液进行稀释，需保留足够的缓冲液用于试剂盒的检测过程。

3．加样
参考下表使用96孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为4、8、16、24、32和 40μl，样品通常可以直接加50μl。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

表1 各组分加样数据表

	空白对照（Blank）	标准品（Standard）	样品（Sample）
ALP反应缓冲液	50μl	(100-x)μl	(50-y) μl
显色底物	50μl	－	50μl
样品	－	－	yμl
标准品工作液	－	xμl	－

4. 混匀：用枪头轻轻吹打混匀，也可借助摇床进行混匀。

5. 孵育：37℃孵育5-10min。（待测样品中ALP活性较低时，可适当延长孵育时间至30min）

6. 终止：每孔加入100μl反应终止液终止反应。此时，标准品或有ALP活性的孔会呈现不同深浅的黄色。

7. 检测：405nm测定吸光度。如果不能测定405nm，也可以在400-415nm范围内检测吸光度。如果不能立即测定，可以在数小时内完成测定，所显现的黄色在数小时（≤ 6h）内稳定。

8. 结果分析
碱性磷酸酶活性单位的定义：在pH9.8的二乙醇胺（diethanolamine, DEA）缓冲液中，37℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个DEA酶活力单位。在pH9.6的甘*酸缓冲液中，25℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个甘*酸酶活力单位。一个甘*酸酶活力单位约相当于3个DEA酶活力单位。本试剂盒测定的是DEA酶活力单位。

最后，根据酶活性单位的定义，计算出样品中的碱性磷酸酶活性。

更多有关北京现货碱性磷酸酶活性检测试剂盒供应的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·7-AAD细胞活力染色液
编号：SY0575
英文名称：7-AAD Viability Staining Solution
规格：150T
本品为7-AAD的即用型染色液，可直接用于细胞染色，其最大激发波长为546nm，最大发射波长为647nm，可在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。若每次（含1×105个细胞）用量10µl，本品可供检测150次。

7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。

另外，7-AAD是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞术检测。

注意事项
1）7-AAD为潜在致癌物质，操作时请穿戴手套、眼罩以及其他防护措施，以避免接触皮肤。
2）玻璃器皿上残留的去垢剂也会影响染色的效果，导致细胞存在或不存在都会出现强荧光。玻璃器皿的清洗应用去垢剂，然后用自来水冲洗数遍后，用去离子水或蒸馏水漂洗。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
【注】：7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。
样品在完成其他染色后，取0.5ml细胞悬液（～1×105个细胞），加入约10µl 7-AAD细胞活力染色剂，根据其激发发射波长（Ex/Em=545nm/650nm）在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。

储存条件：4℃避光干燥

·30%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺，37.5:1
编号：SY0344
英文名称：30% Acryl/Bis Solution, 37.5:1
规格：500ml
Acr-Bis常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺（N，N’-
methylene bisacrylamide，简称Bis ）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度（交叉连接的程度）
所决定。

聚合链的长度与丙*(代"烯")酰胺的浓度有关，交联度由Acr 与Bis的相对比例决定，调节单体丙*(代"烯")酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低，凝胶的
孔径愈大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度愈高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。

30% Acr-Bis(19:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
30% Acr-Bis(37.5:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。

储存条件：4℃,避光。


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·硫*(代"酸")链霉素
编号：SY0530
英文名称：Streptomycin Sulfate
规格：100g
硫*(代"酸")链霉素为一种*基糖苷类抗生素，作用于革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。主要与细菌核糖体30S亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成。

英文名称：Streptomycin Sulfate
CAS No：3810-74-0
分子量：1457.38
分子式：(C21H39N7O12)2·3H2SO4
级别：USP
溶解性：溶于水（50 mg/ml），使用时需过滤除菌
储存条件：2-8℃

·Myc-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0102
英文名称：Myc luciferase reporter plasmid
规格：1μg
Myc荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（Myc luciferase reporter plasimd）是用于检测Myc转录活性水平为目的的报告基因。Myc蛋白是一种转录因子，能通过与Max的结合机制调节细胞的增殖，分化和凋亡的重要基因的转录。

Myc报告基因主要用于检测细胞内Myc调节的信号通路活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMMyc-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个Myc结合位点，可以高灵敏度地检测Myc的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得Myc报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMMyc-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。


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ARB12944 小鼠血红素氧合酶1(HO-1)含量测试 Mouse heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
改良Ringer溶液(pH7.7)  10×MMR 100ml|500ml
BOC-D-天冬*酸 Magnesium Glycinate 62396-48-9
4-苄基*基-7-硝基*(代"*")并氧杂恶二唑 Carmine 18378-20-6
ARB12127 大鼠戊糖素(PentosIdIne)免费代测 Rat pentosidine ELISA KIT
F040307 小鼠IgG1抗原 Mouse IgG1
PY02-077  疱肉培养基基础  250克  
73-24-5 腺嘌呤 Adenine
ARB11570 人基质金属蛋白酶3(MMP-3)尿液中含量检测 Human matrix metalloproteinase 3,mmp-3 ELISA KIT
标准蛋白质溶液(BSA,10mg/ml)   1ml
ARB12005 大鼠S100蛋白(S-100)定量分析 Rat soluble protein-100,s-100 ELISA KIT
DEAE葡聚糖 XOD
细胞膜蛋白提取试剂盒 Membrane protein extraction kit  50T|100T
ARB10711 人多药耐药相关蛋白(MRP)酶联免疫定量检测 Human multidrug resistance-associated protein,mrp ELISA KIT
B1201 大牛血清(辐照灭菌)
ARB13128 小鼠促黄体激素(LH)elisa检测说明书 Mouse luteotropic hormone,lh ELISA KIT
考马斯亮蓝快速染色液 500ml
BTN130574 小鼠抗Flag标签单抗 Anti Flag-Tag Mouse Mab
HC0179 蓝盖玻璃瓶
磷脂酰丝*酸 α-Ketoglutaric acid
*盐染色液(Von Kossa硝酸*(代"银")法)   2×50ml

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