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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
803
- 英文名:
Lysis Buffer for WB/IP Assays
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液现货价格的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液现货价格
规格:100ml
产地:国产|进口
英文名:Lysis Buffer for WB/IP Assays
编号:SY0318
品牌:百奥莱博
本品细胞/组织裂解液,WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,含有sodiu*(代"m") pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodiu*(代"m") orthovanadate和leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解,并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
我公司的免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液现货价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
ARB13055 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)检测服务 Mouse transforming growth factorβ2,tgfβ2 ELISA KIT
头孢曲松 Paromomycin sulfate salt 73384-59-5
ARB12894 小鼠生长抑素(SS)酶标法分析 Mouse somatostatin,ss ELISA KIT
ARB10328 人内吗*(代"啡")肽-2(EM-2)elisa检测说明书 Human endomorphin-2,em-2 ELISA KIT
PY01-079 盐*(代"酸")吡哆辛(VB6) 25克
Na-对甲*磺酰-L-*丙*酸*甲基*(代"酮") Ethoxyquin 402-71-1
F030310 胶体金标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*GOLD
BTN130987 接头DNA Adaptors
免疫染色洗涤液 500ml
豆固醇 Protein protectant DSP50 83-48-7
1-*磷酸*盐 Clearing factor lipase 2183-17-7
ARB13127 小鼠促性腺激素释放激素(GnRH)代做ELISA实验 Mouse gonadotropin-releasing hormone,gnrh ELISA KIT
维生素D3 Naphthol AS-TR acetate 67-97-0
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·KLF4-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0075
英文名称:KLF4 luciferase reporter plasmid
规格:1μg
KLF4荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(KLF4 luciferase reporter plasimd)是用于检测KLF4转录活性水平为目的的报告基因。KLF4(Krüppel-like factor 4)作为真核生物转录因子,参与调控细胞增殖、分化、胚胎发育等重要生命过程,是体细胞重编程为诱导多能干细胞(ips)的重要诱导因子之一。
KLF4报告基因主要用于检测细胞中KLF4的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMKLF4-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个KLF4结合位点,可以高灵敏度地检测KLF4的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得KLF4报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
1. pGMKLF4-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2. KLF4的激活剂,可作为KLF4报告基因的阳性对照。
储存条件:-20℃。
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·40%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺,29:1
编号:SY0340
英文名称:40% Acryl/Bis Solution, 29:1
规格:500ml
Acryl-Bis常用于配制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide,简称Acryl)和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺(N,N’-methylene bisacrylamide,简称Bis)在由TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二*(代"胺"))催化过硫*酸还原产生的自由基的存在下,引发聚合反应,形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。凝胶的孔径由两个参数决定,分别是单体总浓度(%T, w/v)和交联剂比重(%C)。

通过改变这两个参数,可优化孔径确保得到最佳的分离效果和最佳分辨率。%T决定凝胶的相对孔径大小,%T越高,平均孔径越小。
本品为含40%(w/v)Acryl/Bis的水溶液,两者之间的比例为29:1,适合蛋白和核酸分离。
储存条件:4℃,避光
·人纤维连接蛋白
编号:SY0514
英文名称:Human Fibronectin
规格:5mg
细胞纤连蛋白(fibronectin,FN)是一种细胞外糖蛋白,分别以可溶形式存在于体液中,或以不可溶形式存在于细胞外基质中。作为主要的细胞粘附分子之一,FN在许多重要的生理过程中起着关键性作用,如胚胎生成,伤口愈合,止血和血栓形成。纤连蛋白表达的改变,降解以及组合与大量的病理发生密切相关,包括癌症和纤维化。
FN一般以二聚体形式分泌,各个单体的分子量为220-250kDa。主要由成纤维细胞、内皮细胞、软骨细胞、神经胶质细胞和肌细胞等合成,并分布在周围。器官移植会激发一系列的免疫级联反应,FN在T细胞活化过程表现为激活因子。所有FN由同一个基因编码产生,因转录后的mRNA经组织特异性的不同切割方式生成不同的翻译产物。FN上的多个结构域能与胶原、纤维蛋白、肝素和特异性细胞膜受体结合。其中广为人知的结合域是Arg-Gly-Asp 序列(RGD),为整合素识别后调控细胞粘附。FN参与体内众多生理作用和功能,如各种细胞间的吸附和迁移,细胞骨架组装,酪*酸磷酸化和肿瘤转移等。
纤连蛋白(FN)的应用:1)作为细胞培养基质;功能在于促进细胞生长,提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长时间;杂交瘤技术中提高细胞融合率等。2)疾病诊断和治疗;功能在于伤口修复和愈合,癌症诊断和治疗,治疗血管系统和心脑血管疾病等。
本品以冻干粉形式供货,产品稳定性高,易运输。经验证HBsAg阴性,HIV和HCV抗体检测阴性。
来源:人血浆
分子量:440 kD(unreduced form)
纯度(SDS-PAGE):≥97%
储存缓冲液:100mM CAPS buffer containing 0.15M NaCl and 1mM CaCl2, pH 11.0
溶解性:溶于水
储存条件:4℃,有效期13个月
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液现货价格。
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文献和实验量的抗体,同时对免疫沉淀体系也需要有严格的控制指标。免疫沉淀实验从:蛋白样品处理;抗体-agarose beads孵育;抗体-agarose beads复合物洗涤到最后的鉴定,每步都非常关键,需要严格控制实验流程中每个关键步骤的质量,才能最终达到你的实验目的。 IP实验步骤 基本实验步骤 1. 收获细胞,加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30 min, 12 000g离心30 min后取上清; 2. 取少量裂解液以备Western blot分析,剩余
在 WB 和 IP 实验中,破碎细胞或组织与选择和配制裂解液一样重要。比起一些更软的组织(如脑组织),在准备 WB 或 IP 的样品时,紧密的纤维组织(如肌肉组织)需要更剧烈的方法;对于培养的原代细胞或细胞系,在准备 WB 和 IP 的样品时需要一定的机械搅拌去提取蛋白。机械破碎样品常规的方法和设备如下:组织高速匀浆仪通常破碎体积大的植物或者动物组织需要用可旋转、带有刀片的匀浆仪或者搅拌器 .这些仪器通常通过一个电动的马达带动不锈钢可旋转切割刀片,可以从顶部或者底部启动,这个过程中产生很少热量
免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原(一般为蛋白质)并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,再通过电泳转移到固相支持物上,固相支持物包括硝酸纤维素膜,聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附,这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射,生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
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