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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
204
- 英文名:
Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
QN1162型DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)特价促销是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:QN1162型DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)特价促销
编号:QN1162
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:1盒
英文名:Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色,含有抗小鼠IgG酶标二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
试剂盒组分:
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml,效价1:500~3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。
常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜,封闭液内,摇床震动,室温封闭30min。用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量,按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色:根据用量,取TBS-T 4ml,加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul,混匀,加在膜正面,室温下显色。在目标条带显出后,而且背景未出时,放入水中终止显色。
注意事项:
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单,但其敏感性与ECL发光发有一定的差距,一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱,可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带,请检查前期蛋白处理及实验过程, 如果确认无误,反复两次依旧无结果,请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T(0.01M)配制方法:称取NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用800ml 的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH 到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
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QN1162型DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)特价促销关键词:DAB法显色试剂盒(小鼠IgG),QN1162,Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent
·胞嘧啶核苷
编号:QN0561
英文名称:Cytidine
规格:5g
别名:胞苷
CAS号:65-46-3
分子式:C9H13N3O5
分子量:243.22
储存条件:干燥避光保存
·磺基水杨酸
编号:QN0624
英文名称:5-Sulfosalicylic Acid dihydrate
规格:100g
别名:5-磺基水杨酸;二水合-2-羟基-5-磺基*甲*(代"酸");磺基水杨酸;磺基水杨酸,二水;二水磺基水杨酸;磺基水楊酸;5-磺酰水杨酸二水合物;5-磺化水杨酸单水合物;5-磺水杨酸单水合物
英文名称:5-Sulfosalicylic Acid dihydrate
CAS号:5965-83-3
分子式:C7H10O8S
分子量:254.21
·嘌呤核苷磷酸化酶
编号:QN0380
英文名称:Purine Nucleoside Phosphorylase
规格:500U
CAS号:9030-21-1
储存条件:-20℃
性状:白色冻干粉末
分子量:32 kDa (SDS-PAGE)
等电点:6.0
米氏常数:2.2x10-4M (Inosine)
最适pH:7.5~8.0
最适温度:60℃
pH稳定性:5.0~10.0
温度稳定性:<55℃ (pH7.7, 30min)
抑制剂:Ag+,Hg2+
说明:该酶可溶于50mM磷酸*缓冲液(pH 7.7)中。
来源:微生物
比活:≥200U/mg protein
酶活定义:在pH7.7,温度为37℃的条件下,1unit每分钟可氧化1μmol的肌苷磷酸化生成次黄嘌呤和1-磷酸核糖。
·腺苷-3",5"-环状磷酸
编号:QN0560
英文名称:Adenosine 3",5"-cyclicmonophosphoric acid
规格:1g
别名:环磷腺苷;环磷酸腺苷
CAS号:60-92-4
分子式:C10H12N5O6P
分子量:329.21
储存条件:-20℃避光
·PMS
编号:QN0800
英文名称:Phenazine methosulfate
规格:1g
吩嗪硫*(代"酸")甲酯PMS与抗坏血酸维生素C使用测定一氧化*(代"氮")还原酶的活性。凝胶电泳中电子载体、组织培养基、诱变剂。
别名:吩嗪硫*(代"酸")甲酯
CAS号:299-11-6
分子式:C14H14N2SO4
分子量:306.34
性状:黄色至褐色粉末
溶解性:溶于水,参考浓度800mg/4ml
储存条件:-20℃
QN1162型DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)特价促销关键词:DAB法显色试剂盒(小鼠IgG),QN1162,Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent
·2×Pfu PCR MasterMix (含染料)
编号:QN0969
规格:1ml|5ml
PCR MasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix。
Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。
Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。
别名:2×Pfu PCR MasterMix (含染料)
英文名称:2×Pfu PCR MasterMix (含染料)
储存条件:-20
性状:液体
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购QN1162型DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)特价促销。
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