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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌
英文名:Western blotting(Mouse IgG)
品牌:百奥莱博
编号:QN1158
产地:国产|进口
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠IgG二抗——————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
我公司的北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌关键词:QN1158,小鼠IgG,ECL化学发光法检测试剂盒,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG),Western blotting(Mouse IgG)
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北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌关键词:QN1158,小鼠IgG,ECL化学发光法检测试剂盒,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG),Western blotting(Mouse IgG)
·AMPK选择性抑制剂
编号:QN0870
英文名称:Dorsomorphin dihydrochloride
规格:5mg
本品还能抑制ALK2,ALK3和ALK6。
CAS号:1219168-18-9
分子式:C24H27Cl2N5O
分子量:472.41
·ROX参比染料
编号:QN0932
英文名称:ROX Reference Dye
规格:50μl|200μl
不同仪器所需ROX Reference Dye浓度不同。我公司提供ROX Reference Dye储存液,浓度为25µmol/L,使用终浓度根据不同仪器为50nmol/L 或500nmol/L,用户可以根据仪器的推荐浓度添加。为使每个反应精确加入0.1µL,推荐使用前将ROX用水稀释10倍,并使用1µL稀释后的溶液。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
·D-脯*酸
编号:QN0295
英文名称:D-Proline
规格:25g
本品用于β-紫罗兰叉乙*(代"醛")(β-ionylideneacetaldehyde)、视黄醛(retinal) 和相关化合物的非对称自缩合反应(仅供参考)。
CAS号:344-25-2
分子式:C5H9NO2
分子量:115.13
储存条件:室温,避光防潮密闭干燥
纯度:99%
性状:白色细粉末晶体
溶解性:水中溶解度>1000g/L (20℃),不溶于醚。
·5-*-4-*-3-吲哚葡萄糖苷
编号:QN0677
英文名称:X-Gluc
规格:5mg|10mg|25mg|100mg
本品可作为发光底物检测β-葡萄糖苷酶(GUS)基因。
CAS号:114162-64-0
分子式:C20H26BrClN2O7
分子量:521.80
性状:白色结晶性粉末。
溶解性:溶于二甲基甲酰胺(DMF),参考浓度10mg/ml
储存条件:−20℃
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)品牌。