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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
977
- 英文名:
CREB Probe For EMSA(10μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
CREB consensus oligo的序列如下:
5"-AGA GAT TGC CTG ACG TCA GAG AGC TAG-3"
3"-TCT CTA ACG GAC TGC AGT CTC TCG ATC-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验, 5mMDTT加入到结合缓冲液中。如用纯化的蛋白,则用1-2ug的蛋白来检测迁移复合物。 2.AP2:AP2是一个转录调节因子,可分别作为TPA-和cAMP诱导因子(10)。它是一个52 kDa的蛋白,识别的同源序列为5`-CCCCAGGC-3`或5`-GC***GGC-3`(3)。这个因子对视黄酸特别敏感,可能在形态发生中起着重要作用。HeLa细胞核抽提物和AP2同源DNA探针形成一个特定的复合物。用纯化的蛋白作凝胶迁移实验时,应用20-50ng的蛋白。 3.CREB:CREB是一个37
寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是从表达AP2蛋白的大肠杆菌中提取的。另外,Core系统还含SP1同源寡核苷酸,凝胶迁移结合缓冲液,和能作20次对照实验的HeLa核抽提液。Complete系统含另外5个双链寡核苷酸,分别是AP1、OCT1、CREB、nf-kb 、 TFIID结合位点的同源序列。这些寡核苷酸可以在末端标记后用作特异性探针,或在竞争实验中用作非特异性探针。 4. 成功进行凝胶迁移
实验的 一种正对照。系统包括目的寡核苷酸,对照DNA结合蛋白,结合缓冲液,用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统(目录号E3050)包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是从表达AP2蛋白的大肠杆菌中提取的。另外,Core系统还含SP1同源寡核苷酸,凝胶迁移结合缓冲液(5′),和能作20次对照实验的HeLa核抽提液。Complete系统(目录号E3300)含另外5个双链寡核苷酸,分别是AP1、OCT1、CREB,、NF-k B、 TFIID结合
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