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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
989
- 英文名:
NP-40 Lysis Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应NP-40裂解液现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应NP-40裂解液现货,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:NP-40 Lysis Buffer
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| NP-40裂解液 | BTN131009 | 100mL |
产地:国产|进口
英文名:NP-40 Lysis Buffer
编号:BTN131009
品牌:百奥莱博
规格:100mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:
1. 本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2. 本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3. 本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
4. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明 :通常6孔板每孔细胞加入150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200 微升或250 微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20 毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1. 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
NP-40裂解液现货专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:NP-40裂解液,BTN131009,NP-40 Lysis Buffer
我公司生产的NP-40裂解液纯度高价格低,质量有保证,客户更放心。我们为科研用户提供上千种生物试剂现货及sigma全线产品原装期货,货期短,价格低,质量好。用我们100%的真诚、热情换取您100%的信任与支持!
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN151203 | 探针标记及检测 | 生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP ) |
| BTN100811 | 蛋白质研究 | 质谱兼容型蛋白银染试剂盒 |
| BTN130930 | DNA纯化 | 百万碱基级血液DNA提取试剂盒 |
| BTN130662 | 蛋白质研究 | Tth RecA蛋白 |
| BTN151103 | 核酸电泳和回收 | 超级电泳液 |
| BTN101123 | 蛋白质研究 | PVDF膜(0.45μm,13×20cm) |
| BTN140576 | 克隆与表达 | 大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞 |
| BTN131087 | 蛋白质研究 | AP标记亲和素 |
| BTN120310 | 工具酶 | T7 RNA聚合酶 |
| BTN130637 | 工具酶 | Tma核酸内切酶III |
| BTN131210 | 工具酶 | 耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性) |
| BTN60903 | 其他生化试剂 | Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase) |
| BTN71203 | RNA纯化 | 植物RNA柱式提取试剂盒 |
| BTN130835 | 核酸电泳和回收 | 低熔点琼脂糖 |
| BTN131056 | 蛋白质研究 | TCEP溶液(0.5M) |
| BTN70904B | 探针标记及检测 | 酵母tRNA溶液(精提) |
| BTN70906 | 核酸扩增(PCR) | NTP溶液(10mM) |
| BTN130847 | RNA纯化 | 柱式白色念球菌RNA提取试剂盒 |
| BTN101116 | DNA纯化 | 柱式植物油DNA提取试剂盒 |
| BTN100831 | 蛋白质研究 | 5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP) |
| BTN130842 | RNA纯化 | 葡萄球菌RNA提取试剂盒 |
| BTN100931 | 核酸扩增(PCR) | ROX内参染料(25μM) |
| BTN100890 | 其他生化试剂 | 10%Sarkosyl溶液(不含RNase) |
| BTN3191 | RNA纯化 | Tris饱和酚 |
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购NP-40裂解液现货。
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文献和实验细胞裂解分析化学,论坛,化学分析,仪器分析,分析测试,色谱,电泳,光谱u5kLlIO T 采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质分析化学论坛~O/b:te} 相互作用,多采用非离子变性剂(NP40或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。 不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的cocktailer。 2、如何得到比较纯的包涵
降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
7.4 * NP-40: 1% * 去氧胆酸钠:0.25% * NaCl: 150 mM * EDTA: 1 mM * PMSF: 1 mM * 抑蛋白酶肽,亮抑酶肽,胃蛋白酶抑制剂: 各1 μg/ml * Na3VO4: 1 mM * NaF: 1 mM 三、实验流程为: (1)转染后24-48 h 可收获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C,最大转速离心30 min后取上清; (2)取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液加1μg相应
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