强RIPA裂解液现货供应

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百奥莱博专业生产供应强RIPA裂解液现货供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：强RIPA裂解液现货供应
编号：BTN131006
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：250mL
英文名：RIPA Lysis Buffer(Strong)
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

 

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

备注：
1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

想要了解更多关于强RIPA裂解液现货供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
BL1170 通用基因组DNA提取试剂盒
ARB12463 大鼠促性腺激素释放激素受体(GnRHR)含量测试 Rat gonadotropin-releasing hormone receptor,gnrhr ELISA KIT
罗丹明B指示剂   100ml
ARB12003 大鼠S-100b 蛋白ELISA代测服务 Rat soluble protein-100b ELISA KIT
ARB10402 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)酶联免疫定量检测 Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,strail ELISA KIT
BTN130532 EGTA溶液 EGTA Solution
三羟甲基*基甲*(代"烷")乙酸盐 Neodymium(III) chloride 6850-28-8
ARB11211 人细胞色素C(Cyt-C)代做ELISA实验 Human cytochrome-c,cyt-c ELISA KIT
A0201 特级新生牛血清(无菌采制)
PY01-049  月示蛋白胨  250克  
9036-19-5 Triton X-114   曲拉通X-114
辅酶Q10 Disodiu*(代"m") beta-glycerol phosphate pentahydrate 303-98-0
PY01-081A  水解乳蛋白  250克  
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·DNA marker(250-15000bp)
编号：BTN70503T
英文名称：DNA ladder(250-15000bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：2500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。


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·Klenow片段(3´→5´exo-)
编号：BTN131235
英文名称：Klenow Fragment(3´→ 5´exo-)
规格：200U
Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物。它保留了DNA聚合酶活性，具有3´→5´外切酶活性，但不具有5´→3´外切核酸酶活性。可以在DNA模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物dNTP沿5´→3´方向合成与模板互补的DNA。本产品是重组表达得到。

产品用途：
1．双链DNA 5´突出末端的平滑化。
2．用随机引物制备探针。
3．随机引物标记法。
4．寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
5．双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。

产品组成：

成分	规格
Klenow片段(5U/μL)	20μl
10×Klenow Fragment Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

使用举例：(随机引物的同位素标记反应)
1．在微量离心管中配制下列反应液

成份	用量
模板DNA	25ng
随机引物(6-9mer)(1nmol/μl)	2μL
补超纯水到	14μL

2．95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
3．加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μl 111TBq/mmol[α-³²P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μl本产品，反应液共25μl。
7．37℃反应3小时。
8．65℃加热5分钟。
 反应液可直接作为探针使用。如有必要，可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。

注意事项：
1．本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2．由于不含有 5´→3´的外切核酸酶活性，因此没有切口平移活性。
3．可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
4．与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
5．由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用从而抑制反应进行。
6．若用于5´突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
7．与DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物抑制。

我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品，热情期待您的咨询选购强RIPA裂解液现货供应。