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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
497
- 英文名:
Low pH Buffer Set
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
| 货号 | 规格 | 产品价格 |
|---|---|---|
| BTN100830-CIQ | - | ¥170 - 2220 |
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应低pH缓冲液套装价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:低pH缓冲液套装价格
编号:BTN100830
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Low pH Buffer Set
本产品用于Native-PAGE(非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)分离碱性蛋白质,与中pH和高pH系统相比,它使用不同的电泳染料。同时电泳时正负极要颠倒。本产品的特点是即开即用,省去用户单独配置每种溶液的麻烦。
产品组成:
| 成份 | 规格(30次*) |
| 4×浓缩胶配胶液(pH6.7) | 100ml |
| 4×分离胶配胶液(pH4.3) | 200ml |
| 低pH电泳液(pH4.5) | 10L(干粉) |
| 5×低pH上样液 | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
*注:1次是指的一次mini-Gel电泳
储存条件:常温运输及保存(5×低pH上样液需要-20℃保存),有效期为一年。
低pH缓冲液套装价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·单细胞裂解液(RNA提取)
编号:BTN130804
英文名称:Single Cell Lysis Solution
规格:1mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
·红色DNA上样液(6×,非甘油)
编号:BTN130958A
英文名称:DNA Loading Buffer(Red)
规格:10mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
·水样病毒沉淀剂
编号:BTN101118
英文名称:Water Sample Virus Precipitation Reagent
规格:10次
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
·消解酶干粉(溶细胞酶)(≥200U/mg)
编号:BTN100919
英文名称:Digestion enzyme,powder
规格:100mg
本品是从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus后改名为Oerskovia xanthineolytica)深层培养获得的酶干粉,它能有效的裂解活酵母细胞细胞壁。其主要成分是Alkaline Proteinase和β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucanlaminaripentaohydrolase),前者负责破坏细胞壁的甘露糖蛋白层使后者能够进入细胞壁外层葡聚糖层并发挥作用。本产品主要用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球形成及葡聚糖水解。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号:BTN130949
英文名称:Gram positive bacteria DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
本品是从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus后改名为Oerskovia xanthineolytica)深层培养获得的酶干粉,它能有效的裂解活酵母细胞细胞壁。其主要成分是Alkaline Proteinase和β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucanlaminaripentaohydrolase),前者负责破坏细胞壁的甘露糖蛋白层使后者能够进入细胞壁外层葡聚糖层并发挥作用。本产品主要用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球形成及葡聚糖水解。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·Taq DNA聚合酶
编号:BTN51206
英文名称:Taq DNA Polymerase
规格:500U
本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5´→3´聚合酶活性和5´→3´外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个*基酸,分子量为94 Kd。该酶可以广泛用于PCR,RT-PCR,加尾反应等。
产品特点:
1.耐热DNA聚合活性,该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65~68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2.热稳定,在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3.Mg2+离子依赖性,MgCl₂浓度在2.0mM时该酶催化活性最高。
4.本酶无3´→5´外切活性,不具3´→5´校对功能,碱基错配机率为2.1×10⁻⁴。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 20μl |
| 10×PCR Buffer(含Mg2+) | 1ml |
| MgCl2,25mM | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.按下列组份配制PCR反应液。
| Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 0.25μl |
| 10×PCR Buffer(含Mg2+) | 5μl |
| MgCl₂(25mM) | 根据需要补加 |
| 自备dNTP(各2.5mM) | 4μl |
| 模板DNA | 见下 |
| 引物1(20μM) | 1μl |
| 引物2(20μM) | 1μl |
| 灭菌蒸馏水 | Up to 50μl |
注:10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM),是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng |
| 质粒DNA | 5-500pg |
| PCR回收片段 | 1-100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
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·超敏型BCA法蛋白定量试剂盒
编号:BTN80816
英文名称:Hypersensitive BCA Protein Assay Kit
规格:500次
本产品是在BCA法蛋白定量试剂盒(BTN80815)基础上改进的超敏蛋白定量试剂盒,尤其适合对低浓度的蛋白质溶液进行定量分析。
产品特点:
1.超敏感,最低检测浓度为0.5μg/mL。
2.线性范围在 0.5~20μg/mL,尤其适用于低浓度的样品。
3.对大多数离子型和非离子型去污剂不敏感,但对Cu的还原剂和螯合剂敏感。
4.比 Lowry法更加简单快捷,45分钟内完成测定。
5.试剂稳定,室温可以放置两年,工作液1 天内有效。
6.终产物稳定,检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7.最短可以检测双肽,所以适合于分子量较小的蛋白质,而Bradford法需要一定大小的蛋白质。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 250ml |
| 溶液B | 250ml |
| 溶液C | 10ml |
| BSA标准品(2mg/mL) | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:(96板操作模式)
1.将本试剂盒提供的BSA标准品用自备的样品缓冲液稀释成浓度为0.04μg/uL的工作液待用(一次测试所需BSA标准品工作液的用量参见下表)。
2.取一块96孔板,先进行编号(编号可以根据样品数增加),并按照下表加入BSA工作液、待测样品和样品缓冲液:
| 编号 | BSA工作液 (μL) |
待测样品 (μL) |
样品缓冲液 (μL) |
总体积 (μL) |
蛋白含量 (μg) |
| 0 | 0 | 0 | 150 | 150 | 0 |
| 1 | 5 | 0 | 145 | 150 | 0.2 |
| 2 | 10 | 0 | 140 | 150 | 0.4 |
| 3 | 20 | 0 | 130 | 150 | 0.8 |
| 4 | 40 | 0 | 110 | 150 | 1.6 |
| 5 | 60 | 0 | 90 | 150 | 2.4 |
| 6 | 80 | 0 | 70 | 150 | 3.2 |
| 7 | 100 | 0 | 50 | 150 | 4.0 |
| 样品1 | 0 | ?μl | 补到150 | 150 | 未知 |
| 样品N | 0 | ?μl | 补到150 | 150 | 未知 |
3.计算 BCA工作液需要量:根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.15mL BCA工作液的比例,计算所需BCA工作液的用量。
4.配制 BCA工作液:先将溶液A、溶液B和溶液C按50:48:2的比例混合,所得溶液即BCA工作液。比如:5mL溶液A + 4.8mL溶液B + 200μL溶液C。
5.将1倍体积(即150μL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
6.60℃放置1小时。
7.冷至室温,10分钟内完成后续测定,否则化学反应还在继续进行,光吸收值会慢慢升高,每10分钟会升高2.5%左右。
8.在 562nm下比色测定其余样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定,可用接近的波长检测,如570nm。
9.将编号为0 号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品,其读数变成零)中扣除。
10.以0-7 号样品的BSA含量(μg,见上表最右行)为横坐标,以上一步得到的这几个样品的吸光值为纵坐标,绘出BSA的标准曲线。
11.再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后)标在标准曲线上,其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量,除以样品稀释液总体积(20μL),乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度(单位:μg/uL)。
注意事项:
1.加工作液后也可以在室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以,如果蛋白质浓度较低,可以改在60℃孵育60分钟。
2.待测样品浓度在20~2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3.在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响:
| 名称 | 在此浓度下不受影响 |
| Ammonium Sulfate | 1.5 M |
| Brij-35 | 5.0% |
| CHAPS | 5.0% |
| EDTA | 10mM |
| Hepes | 100mM |
| Glycine,pH2.8 | 100mM |
| Guanidine HCl | 4.0 M |
| Tween 20、60、80 | 5.0% |
| SDS | 5.0% |
| Sodium Acetate pH5.5 | 200mM |
| Sodium Chloride(NaCl) | 1.0 M |
| Sucrose | 40% |
| Sodium Hydroxide(NaOH) | 0.1 M |
| NP-40 | 5.0% |
| Triton X-100 | 5.0% |
| Urea | 3.0 M |
4.本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响,所以需确保EDTA浓度不高于10mM,二硫苏糖醇不高于1mM,β-巯基乙醇不高于1mM,没有任何 EGTA,否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。
5.本试剂受温度和时间影响较大,故需要准确定时和定温,以保证精确定量。
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