DNA拓扑异构酶 I促销

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百奥莱博专业生产供应DNA拓扑异构酶 I促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：DNA拓扑异构酶 I促销
编号：BTN120414
规格：100U
品牌：百奥莱博
英文名：DNA Topoisomerase I
DNA拓扑异构酶I来源于小牛胸腺，与来源于原核生物的酶性质不同，在无Mg2+的条件下也具有活性。而且，原核生物的DNA Topoisomerase I只作用超螺旋分子的负链，而本酶则能使来源于超螺旋分子正负链均形成松散型，DNA Topoisomerase I催化4种反应：
➤ 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
➤在单链环状DNA分子内形成绳结(Knotting)和解开绳结(Unknotting)。
➤ 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
➤ 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。

产品组成：

 

成份	规格
DNA拓扑异构酶I(5000U/mL)	20μL
10×Buffer	1mL
BSA,10mg/mL	10mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在25μl反应体系，37℃条件下，15分钟内能催化超过95%的0.5μg pUC19RFI型(负超螺旋)DNA 松弛所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含*化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。

热灭火：65℃加热20分钟。

注意事项：
➤ pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I(超螺旋分子)用DNA Topoisomerase I反应后电泳，胶中含*乙锭(EB)时，反应前后DNA带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响，再次变为超螺旋状态。因此，使用Topoisomerase I反应后，一般使用不含EB的琼脂糖凝胶电泳，电泳终了后再用EB染色。
➤ 如果在10×添附Buffer中直接加入0.1%小牛血清白蛋白溶液，会产生大量的白色沉淀。因此，在反应液调制时需按以下顺序添加试剂：dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。
➤ BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

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·Verhoeff固定液
编号：BTN140588
英文名称：Verhoeff Fixative Solution
规格：250mL
本产品为眼球常用固定液，主要成分为甲醛、酒精、苦味*(代"酸")。固定48h后，即可脱水。固定于Verhoeff固定液中的眼球可以长期保存。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·SuperTOPO-Kan通用克隆试剂盒
编号：BTN160685-25K
英文名称：SuperTOPO Cloning Kit
规格：25次
本产品为眼球常用固定液，主要成分为甲醛、酒精、苦味*(代"酸")。固定48h后，即可脱水。固定于Verhoeff固定液中的眼球可以长期保存。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·甲叉双丙稀酰胺(电泳级)
编号：BTN100877
英文名称：Bis-Acrylamide
规格：25g
N,N"-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(Bis-Acrylamide)，又名亚甲基双丙*(代"烯")酰胺，次甲基双丙*(代"烯")酰胺，N,N"-甲撑双丙*(代"烯")酰胺。CAS号是110-26-9。它是一种白色白色或微黄色晶体粉末，无味，吸湿性极小。遇高温或强光则自交联，微溶于水、乙醇，溶于丙*(代"酮")，微溶于*。是一种用于制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的交联试剂。

储存条件：常温运输及保存、防潮，有效期两年。
注：本产品属于中等毒性物质，主要引起神经系统毒性。

·96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)
编号：BTN131211
英文名称：PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
规格：1次
N,N"-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(Bis-Acrylamide)，又名亚甲基双丙*(代"烯")酰胺，次甲基双丙*(代"烯")酰胺，N,N"-甲撑双丙*(代"烯")酰胺。CAS号是110-26-9。它是一种白色白色或微黄色晶体粉末，无味，吸湿性极小。遇高温或强光则自交联，微溶于水、乙醇，溶于丙*(代"酮")，微溶于*。是一种用于制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的交联试剂。

储存条件：常温运输及保存、防潮，有效期两年。
注：本产品属于中等毒性物质，主要引起神经系统毒性。

·Afu尿嘧啶-DNA糖基化酶
编号：BTN130648
英文名称：Afu Uracil-DNA Glycosylase
规格：200U
Afu尿嘧啶-DNA糖基化酶(Afu UDG)是E.coli尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)热稳定的同源蛋白，来源于闪烁古生球菌。该酶从含尿嘧啶的DNA上催化释放尿嘧啶，能有效地水解双链和单链DNA上的尿嘧啶。其反应示意图如下：


产品特点：
1．热稳定；
2．从双链或单链DNA上切下尿嘧啶。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指每分钟从含尿嘧啶双链DNA上催化释放60pmol尿嘧啶所需要的酶量。


DNA拓扑异构酶 I促销关键词：DNA拓扑异构酶 I,BTN120414,DNA Topoisomerase I


·dATP溶液(2.5mM)
编号：BTN130912
英文名称：dATP Solution(2.5mM)
规格：2mL
dATP分子式为C10H13N5O12P3Na3,分子量是557.2，消光系数为15.2×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为259nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·DNA嵌套缺失试剂盒
编号：BTN100213
英文名称：DNA Nested Deletion Kit
规格：10次
本产品是在Henikoff方法的基础上改良而得。最常见的DNA嵌套缺失方法是利用ExoⅢ等外切酶从线状DNA的一端连续切除核酸，最后环化得到可以转化的质粒。该方法最早由Henikoff在Putney的方法的基础上发明，其流程图如下：


产品特点：
1．不需要使用超螺旋的质粒和任何限制性内切酶，非常皮实。
2．一站式，用户只需要提供质粒，不需要单独准备其他试剂。
3．一管式，不需要任何纯化和回收的处理。
4．提供阳性对照质粒，便于在遇到困难时分析原因。
5．得到的片段可以用于侧序和蛋白结合位点的分析等试验。

试剂盒组成：

成份	规格
DNA聚合Buffer	1mL
DNA酶切Buffer	1mL
酶切终止Buffer	1mL
DNA连接Buffer	1mL
T4 DNA聚合酶	10μL
T4 DNA Ligase	10μL
Exo Ⅲ	10μL
S1核酸酶	10μL
对照模板质粒	10μg
超纯水	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用效果：
将5μg变性的质粒DNA与特异的引物混合，用T4 DNA聚合酶进行全长合成，然后用ExoⅢ酶切，在不同时间点取样，得到单向酶切产物，然后用绿豆核酸酶去掉单链DNA，最后用DNA连接酶将DNA自身环化，最后转化细菌。

图注：用本产品处理含有2.5 KB插入片段的质粒，两边为1Kb DNA marker。中间6条带从左到右分别为ExoⅢ处理0、1、2、3、4和5分钟的DNA(S1核酸酶处理后才上样电泳)


DNA拓扑异构酶 I促销关键词：DNA拓扑异构酶 I,BTN120414,DNA Topoisomerase I


·石蜡油，PCR级
编号：BTN130841
英文名称：Paraffin，PCR Grade
规格：10mL
本产品是PCR级石蜡油试剂，专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中，封闭反应成分，防止溶液的挥发。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·大肠杆菌TG1电击感受态细胞
编号：BTN160801
英文名称：E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell
规格：50μL×5
 TG1电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7小时可见克隆，是主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。

菌株基因型：[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。

使用方法：
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μl/50μl感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温)，用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等)，向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床，37℃，225 rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。

注意事项：
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。

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