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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
986
- 英文名:
Affinity Chromatography Colum(50mL)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应50mL亲和层析柱促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:50mL亲和层析柱促销
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:50mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:

储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:

除50mL亲和层析柱促销外,我公司正在打折促销以下产品:
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维拉帕米盐*(代"酸")盐 Boc-D-glutamine 152-11-4
50mL亲和层析柱促销关键词:50mL亲和层析柱,BTN140653,Affinity Chromatography Colum(50mL)
·柱式BAC载体DNA提取试剂盒
编号:BTN90607
英文名称:BAC carrier DNA column extraction kit
规格:50次
BAC是专门用于克隆长片段插入片段的载体,可以插入的片段一般在30-300 Kb,平均长度为130 Kb。但用常规的质粒DNA提取方法提取15 Kb以上的质粒DNA效果都不尽人意,为此本公司对常规的方法进行了诸多改良。
试剂盒特点:
1. 使用于不超过 100 kb的大型质粒DNA,包括BAC、PAC、P1和Cosmid等。如果超过100 kb,建议使用沉淀法或离子交换法。
2. 每 mL细菌培养液可纯化到50-150 ng左右的BAC和其他大型质粒DNA。
3. 安全,无酚*仿等危险的有机物抽提。
4. 柱式操作,比经典的沉淀法操作简单,重复性好,每次都能获得理想效果。
5. 得到的DNA 纯净,可以直接用于PCR、酶切和测序,不需要再纯化。
6.超值,性价比高。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.75ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(RNase A溶液需要4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 接种单个菌落到 2-5mL LB培养基中,37℃摇晃过夜培养。注意:不要使用Terrific Broth或2×YT培养基等高营养培养基,因为这样得到的菌液细菌密度太高,纯化BAC时,蛋白质和RNA污染较多,反而会影响BAC的产率。
2. 12000~15000×g 4℃离心5分钟,弃上清(培养基),再短暂离心,吸弃残留液体(培养基),得到细菌沉淀。
3. 用 250μL溶液A(第一次用前需先将全部RNase A溶液加入到13mL溶液A中,摇匀后再取用。未用完的溶液A最好在4℃保存)重悬细胞沉淀,必要时用枪头充分吹打使菌体重悬已保证没有成团的细菌块。
4. 冰上放置5分钟。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可。此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染BAC DNA。
6. 冰上放置4分钟。注意:一定要严格控制时间,时间超过4分钟,BAC产率将大大降低。
7. 加入350μL溶液C,轻柔颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生。
8. 冰上放置5分钟。
9.室温 12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。
10. 静置 2分钟以让BAC DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
11.室温 12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。
12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
13. 重复上步1次。
14.室温 12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA 洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
16.室温 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即BAC DNA。
17. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多BAC DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA 洗脱液来洗脱。
18. 得到的BAC DNA即可用于后续的检测或实验。
其他处理:
1. 如果要制备无内毒素BAC DNA,则需要用液相内毒素清除剂(需要另购)处理BAC DNA溶液。或者在提取BAC DNA之前,用菌体内毒素清除剂(需要另购)处理细菌。
2. 如果有基因组 DNA污染,可以用线状DNA 清除剂(需要另购)将其酶解。
3. 如果有 RNA污染,可以加入RNase酶解,然后用酚*仿抽提,再用乙醇沉淀。
4. 如果有蛋白质污染,可以用酚*仿抽提,再用乙醇沉淀。
50mL亲和层析柱促销关键词:50mL亲和层析柱,BTN140653,Affinity Chromatography Colum(50mL)
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我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品,热情期待您的咨询选购50mL亲和层析柱促销。
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文献和实验Affinity Column Preparation 亲和层析柱制备
1.Prepare 1 ml of packed beads by washing them 4 times in 10 ml of d-H2O in a 15 ml tube.The beads are Act.Ultrogel 22 AcA from IBF,and stored in the coldroom.The protein binding site is via glutaraldehyde groups.2 mls of beads from the vial
Affinity Column Preparation--亲和层析柱制备
Affinity Column Preparation 亲和层析柱制备 Peter Novick Lab,Department of Cell Biology Yale University School of Medicine1.Prepare 1 ml of packed beads by washing them 4 times in 10 ml of d-H2O in a 15 ml tube.The beads are Act.Ultrogel 22 AcA from IBF
Preparation of Affinity Column制备亲和层析柱【UCSF】
1.Add 222.2μl 1M MOPS,pH 7.5 to 2ml of 10mg of CREBtide (0.1M MOPS pH 7.5 final concentration). 2.Read OD205,OD280 (using 0.1M MOPS buffer as blank) 3.Affigel-10 is stored frozen at 4.Filter 1-2ml on nylon (0.22uM poresize),using Buchner funnel
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









