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- 详细信息
- 技术资料
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232
- 英文名:
Hirudin Solution
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
BTN130542型水蛭素溶液(2万ATU/mL)品牌的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多水蛭素溶液(2万ATU/mL)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:BTN130542型水蛭素溶液(2万ATU/mL)品牌
规格:0.1mL
英文名:Hirudin Solution
编号:BTN130542
本产品为水蛭素水溶液,浓度为20000ATU/mL,工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个*基酸残基的小分子蛋白,水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物,相对分子量约为7000 道尔顿,是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂,其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。
产品特点:
1.其优点是抗原性弱,少有过敏反应。
2. 不与血小板结合,极少导致血小板减少。
3. 稳定性好,毒性低。
储存条件:低温运输,-20℃保存。
活力单位定义:一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指,37℃下,灭活一个NIH 单位凝血酶的量
使用方法:根据具体实验要求不同,加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。
除BTN130542型水蛭素溶液(2万ATU/mL)品牌外,我公司正在打折促销以下产品:
·Bradford法蛋白定量试剂盒
编号:BTN80814
英文名称:Bradford Protein Assay Kit
规格:100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是最为常用的蛋白检测方法之一,在酸性条件下,考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物,其最大吸光值也由465nm转移到595nm,通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。
产品特点:
1.快速,10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2.稳定,加样混匀后2分钟既可测定,1小时内吸光度变化不超过10%。
3.线性范围在 50~1000μg/mL。
4.最小测量体积为1-20μL,最低测量蛋白量为0.5μg。
5.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
6.有常规和微量两种检测模式。
7.不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8.但受略高浓度的表面活性剂影响,各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| BSA标准(2mg/mL) | 1ml |
| 滤纸 | 20张 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,BSA 标准-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、常规检测流程:
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1:4 比例充分混合即为1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3.检测:蛋白样品与1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液,适用于3mL的比色杯;40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液,适用于1mL的比色杯;20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液,适用于平底透明96孔板)。
4.加样后,充分混匀。
5.室温放置5分钟。
6.检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项:
1.不同型号、规格的滤纸,具有不同的孔径,导致可通过的分子各不相同。请使用本公司指定提供的滤纸,否则会导致不同的测定结果。
2.检测样品之前,应首先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.检测细胞提取物或纯化蛋白样品,应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4.用 96孔板测定时,应确保没有气泡,否则会绝对增加吸光度的读数。
5.此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量样品加水稀释到适当浓度,再行测定。
二、微量检测流程:
此方法在蛋白浓度1~20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.蛋白样品与溶液A按4:1比例混合,例:
| 蛋白样品 | 溶液A | 适用性 |
| 400μL | 100μL | 平底透明96孔板 |
| 2mL | 0.5mL | 1mL的比色杯 |
| 4mL | 1mL | 3mL的比色杯 |
2.加样后,充分混匀。
3.室温放置5分钟。
4.检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项:
1.Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品,可用1MNaOH 溶解和稀释。
2.Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精*酸残基的数目,因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3.标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。
4.由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。
5.不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法),Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。
BTN130542型水蛭素溶液(2万ATU/mL)品牌关键词:Hirudin Solution,2万ATU/mL,BTN130542,水蛭素溶液(2万ATU/mL)
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BTN130542型水蛭素溶液(2万ATU/mL)品牌关键词:Hirudin Solution,2万ATU/mL,BTN130542,水蛭素溶液(2万ATU/mL)
·3M乙酸*溶液(pH5.2)(RNase-Free)
编号:BTN60703
规格:250mL
·T3 RNA聚合酶
编号:BTN120309
英文名称:T3 RNA Polymerase
规格:1000U
本酶是噬菌体T3 DNA编码的酶,对T3启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5´→3´的RNA聚合酶活性,以含有T3启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
产品用途:
1.为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2.制作 RNA 剪接反应的前体。
3.以帽类似物为引物,制作Capped mRNA。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| T3 RNA聚合酶 | 50μL(20U/μL) |
| 5×转录缓冲液 | 0.25mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。
·非酶RNA清除剂1.0
编号:BTN51203
英文名称:Non-enzymatic RNA scavenger 1.0
规格:1.5mL
本品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂,专用于从碱变性法纯化的质粒中去除其中的绝大部分RNA污染和大部分蛋白质污染。
产品特点:
1.高效,能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA,不能去除蛋白质污染。
2.快速,整个过程只需要十余分钟,不需要37℃保温。
3. 经过本产品处理过的样品,由于没有RNA和蛋白质的干扰,使用硅胶膜或其他吸附离心法吸附、回收质粒DNA的效率比没处理过的样品更高。
4. 价格不到RNase A的1/2,在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。
5. 制备临床用(如基因治疗)的质粒DNA时,可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A和蛋白酶时,容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一、从碱变性澄清液中去除RNA和蛋白质
1. 将约1/5体积的RNA Scavenger加入到碱变性澄清液中(加溶液III后离心得到的上清液一般是450μl,所以需要加入50μl)。
2. 混匀后室温放置10分钟。
3.室温8000g离心10分钟。
4.转移上清到一新的离心管中,后续处理跟经典的方法一样(即加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀后室温离心10分钟,弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次,短暂离心,去掉残留液体,加入适量TE缓冲液溶解质粒待用)。
二、从质粒粗提液中去除RNA和蛋白质
1、将1/4体积的RNA Scavenger-1直接加入到已经溶解在TE或其他溶解液的质粒DNA中。
2、混匀后室温放置10分钟。
3、室温8000g离心10分钟。
4、转移上清到一新的离心管中,加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇。
5、混匀后室温离心10分钟。
6、弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次。
7、短暂离心,去掉残留液体。
8、加入适量TE缓冲液溶解质粒待用。
使用效果:
图注:用经典的碱变性法从1.5mL E.coli过夜培养液中提取的pGEM-3质粒粗提物(加溶液ⅡI离心上清)经过RNA Scavenger处理后(LA+RNA Scavenger)与未经处理的样品(AL)电泳比较。上样量为1/5。
图注:用经典的碱变性法提取的pGEM-3质粒DNA溶于TE中后,经过RNA Scavenger处理的(+)与未经处理的(-)样品进行电泳比较。处理过的样品失去80%左右的RNA。
疑难解答:
Q:电泳检测质粒DNA时也需要将其RNA污染去掉吗?
A:是。否则RNA 将结合大部分的EB溶液,使质粒DNA的带型减弱。
Q:RNA Scavenger-1跟RNA Scavenger-2 有何区别?
A:
1. RNA Scavenger-2处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理,而RNAScavenger-1处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Scavenger-1;
2. RNA Scavenger-2与柱式硅胶膜纯化方法兼容,而RNA Scavenger-1 不兼容;
3. RNA Scavenger-2 不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染,还可以用于去除基因DNA的RNA污染,而RNA Scavenger-1只能用于质粒DNA样品。
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