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北京现货酵母产孢培养基批发

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  • ¥190 - 1890
  • 百奥莱博
  • BTN130902-COG
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      北京百奥莱博科技有限公司

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      326

    • 英文名

      Sporulation Medium

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货酵母产孢培养基批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京现货酵母产孢培养基批发
    英文名:Sporulation Medium
    编号:BTN130902
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    规格:250mL
    本产品由1% KOAc和2%的琼脂组成,用于MATa/MATa二倍体细胞不经过营养生长的过程直接在18-24小时后产孢。如果二倍体细胞是营养缺陷性,则还需要补充加入营养成分。

    储存条件:常温运输及保存,有效期两年。

    北京现货酵母产孢培养基批发正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·Pfu DNA聚合酶
    编号:BTN51207
    英文名称:Pfu DNA Polymerase
    规格:100U
    Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增,还可以用于DNA片段的粘转平反应。

    产品特点:
    1.它具有3´-5´聚合酶活性,跟常用的Taq DNA聚合酶一样,能够用于PCR反应。
    2.与Taq DNA Polymerase不同的是,它还具有3´-5´外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
    3.其出错率最低的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中最低的。
    4.Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍维持90%以上活性。

    产品组成:

     
    成分 规格
    Pfu DNA聚合酶(3U/μL) 100U
    10×Pfu Buffer 0.1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存。

    使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

    1.按下列组份配制PCR反应液
    Pfu DNA聚合酶(3U/μL) 0.5-1μL
    10×Pfu Buffer 5μL
    dNTP Mixture(各2.5mM) 4μL
    模板DNA 见下
    引物1(10 uM) 1μL
    引物2(10 uM) 1μL
    灭菌蒸馏水 Up to 50μL

    推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
    哺乳动物基因组DNA 0.5-1μg
    酵母基因组DNA 5-500ng
    细菌基因组DNA 0.5-50ng
    质粒DNA 5-500pg
    PCR回收片段 1-100pg


    2.PCR反应条件
    以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
    温度 时间 循环数
    94℃ 3min  
    94℃ 30sec 30~50循环数
    55℃ 30sec
    72℃ 2min
    72℃ 5min  

    注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

    注意事项:
    PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。

    10×Pfu Buffer的组成:200mM Tris-HCl(pH8.8),100mM KCl,100mM(NH₄)2SO₄,500mM MgSO₄

    活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。

    质控标准:
    1.SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
    2.无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。


    北京现货酵母产孢培养基批发关键词:Sporulation Medium,酵母产孢培养基,BTN130902


    ·1M DTT溶液(RNase-Free)
    编号:BTN60405
    规格:10mL

    ·地高*(代"辛")标记dUTP溶液(Digoxin-11-dUTP)
    编号:BTN100921
    英文名称:Digoxin-dUTP Solution
    规格:25μL
    本产品是浓度为0.35mM的DIG-11-dUTP。用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等标记DNA。

    储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。

    ·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)
    编号:BTN81212B
    英文名称:One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
    规格:30次
    非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一,跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同,它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同,所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐,为此本公司开发了本产品。

    产品特点:
    1.即开即用,不需单独准备各种成分,十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
    2.非变性,电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用,得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
    3.可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
    4.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
    5.提供具有3种不同pH的缓冲液套装,便于客户选择最适合的缓冲液体系。

    产品组成:
    成分 规格
    丙*(代"烯")酰胺干粉 60g
    甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 3g
    TEMED 1.5ml
    过硫*(代"酸")铵干粉 1g
    高中低缓冲液套装选一 ABC之一(见下)
    说明书 1份
    高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
    高pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× 100ml
    高pH分离胶配胶液(pH8.9),4× 200ml
    高pH电泳液(pH8.3) 10L(干粉)
    高pH上样液,5× 1ml
    中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
    中pH浓缩胶配胶液(pH5.5),4× 100ml
    中pH分离胶配胶液(pH7.5),4× 200ml
    中pH电泳液(pH7.0)干粉A 55.2g
    中pH电泳液(pH7.0)干粉B 10g
    中pH上样液,5× 1ml
    低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
    低pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× 100ml
    低pH分离胶配胶液(pH4.3),4× 200ml
    低pH电泳液(pH4.5) 10L(干粉)
    低pH上样液,5× 1ml

    注:高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液,只是pH不同。

    储存条件:常温运输和保存(上样液需-20℃保存),保存期为一年。

    使用方法:
    如何选择缓冲液?
    高pH浓缩胶,高pH分离胶,高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此,绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液,电泳液,配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要,缓冲液的最佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI,则蛋白质分子带电多(电荷密度大),电泳速度快,分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性,失去活性,所以最佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡,需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定,没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5,所以在不知道目标蛋白的pI时,可以先选用高pH缓冲系统。

    一、配制分离胶
    1.确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质,可选用3-5%的胶;对分子量在20-150KD之间的蛋白质,可选用5-10%的胶;对分子量在10-80KD之间的蛋白质,可选用10-15%的胶。对未知样品,建议使用7.5%的胶。
    2.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液,该溶液可以在4℃存放一周。
    3.配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完,必须4℃避光保存。
    4.配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
    5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
    6.加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。注意:如果购买的是低pH缓冲系统,由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低,所以需要增加上述两成分的用量。
    7.在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水,使胶顶部液面平整。由于比重不同,水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
    8.室温聚合30-60分钟后,用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。

    二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率,适合于成分复杂的样品,一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同,蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品,可以不用浓缩胶,此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度,尺寸和形状相关。)
    1.配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
    2.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
    3.按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
    4.在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
    5.室温聚合30-60分钟,拔出梳子,用1×电泳液冲洗加样孔。

    三、电泳
    1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注:本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种,低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液,可以室温放置,用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH,但保险起见,可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3,7.0和4.5。
     注意:中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液,否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A,5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀,加去离子水至彻底溶解,调PH7.0,定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
    2.连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI,目标蛋白将带负电荷并向阳极移动,可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极);如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI,目标蛋白将带正电荷并向阴级移动,此时应该下阴极上阳极。
    3.300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
    4.换电泳液。
    5.在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl,1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意:如果用考染检测,每个孔的蛋白最好在50-100μg总蛋白,如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀,可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA),用前最好用pH试纸测试一下,不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
    6.上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
    7.用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意:电泳过程最好在冷室或有冷却系统,以免电泳产热使蛋白质变性。
    8.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。


    北京现货酵母产孢培养基批发关键词:Sporulation Medium,酵母产孢培养基,BTN130902

    BL0872 羊抗猪IgG免疫血清 0.5ml
    HC0048 5ml冻存管
    ARB13769 鸭病毒性肠炎病毒(DEV)酶标法分析 Duck virus enteritis,dev ELISA KIT
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    68-94-0 次黄嘌呤 Hypoxanthine
    SJ0298 Glufosinate-ammonium 草铵膦
    *检测试剂盒(Calmagite微板法)   100T
    L-谷*酸-5-甲酯 Bismuth subcarbonate 1499-55-4

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