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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
375
- 英文名:
FFPE Total Protein Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销
品牌:百奥莱博
编号:BTN130888
规格:50次
英文名:FFPE Total Protein Extraction Kit
产地:国产|进口
石蜡包埋组织是很重要的临床材料,研究其正常细胞和疾病相关的细胞,特别是癌细胞中标记蛋白的差异表达水平,对于判断癌化的进展,癌症的类型的判定,以方便于诊断和治疗有重要的意义,然而体外培养的细胞的蛋白差异表达水平并不能够真实反映体内细胞的真实状况,因此从石蜡包埋组织中提取蛋白并且加以研究有很重要的意义,本试剂盒通过特殊的快速脱蜡试剂和蛋白质抽提试剂,在两种不同的温度条件下温育,可以将被铰链的蛋白质释放出来,经过简单的离心步骤,上清中含有的蛋白经过沉淀洗涤和溶解后,可以用于Western Blot 、SDS-PAGE、ELISA、2D电泳或蛋白质芯片分析等,本试剂盒可以使用50次左右。
产品特点:
1. 不含有去污试剂,适用于非染色的标本。
2.可以适用于甲醛浸泡的组织标本。
3. 不需要超速离心,可以同时处理多个标本。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 预处理试剂A | 100mL |
| 预处理试剂B | 5mL |
| 提取试剂 | 5mL |
| 沉淀试剂 | 75mL |
| DTT干粉 | 80mg |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温下运输和保存,但DTT和提取试剂需要4℃保存,盛装预处理试剂A的瓶子已经密封,请在使用后,将剩余的预处理试剂A倒入一个有内盖的瓶中,同时盖紧内外盖,以防止挥发。盛装预处理试剂A,B和沉淀试剂的瓶盖要盖紧,同时避免火源。
使用方法:
1. 取两块大约10-15μm厚,100mm2石蜡包埋组织切片到1.5mL的干净离心管中,加入1mL预处理试剂A,高速涡悬震荡30 sec,室温静置5 min,期间偶尔颠倒离心管数次。
2. 加入100μL预处理试剂B,涡悬震荡10sec,再10000rpm(10000g)离心2min,移去上下两层的液体。
3. 用500μL的超纯水清洗脱蜡的组织两次,离心并尽量吸去液体,保留组织块沉淀。
4. 加入100μL提取试剂(用前需要将DTT全部加入到装提取试剂的瓶中,摇晃混匀,未用完的提取试剂需要4℃放置),盖上盖子,涡悬震荡数秒。
5.在水浴锅中100℃加热20 min,短暂离心一下,再用组织研磨棒将切片组织磨碎。
6.在水浴锅中60℃加热2 hour,期间大约每20 min取出,震荡一次。
7. 4℃,12000rpm(12830 g)离心15 min,小心将上清转移到一个新的1.5mL的干净离心管中。注意:在上清中的蛋白质可以在4℃的环境条件下保存一个星期,如果需要长期保存,请放置在-20℃的环境中,同时避免 反复冻溶,也可以使用我公司生产的非干扰型蛋白浓度测定试剂盒对上清中的蛋白质直接定量。
8. 加入1mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min。
9. 4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀。
10. 加入0.5mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min,再4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀,在通风橱中将试管倒置在滤纸上,让残余的液体挥发干净。
11. 将固体沉淀溶解于合适的自备的缓冲液中,再4℃,12000rpm离心5 min,收集上清,用于SDS-PAGE,Western blot等实验。注意:此上清中含有DNA,RNA 残留,所以溶液有些发粘,加入少量的micrococcal nuclease,benzonase等消化,有助于减少粘性,但是即使不处理一般不会影响后续实验,用枪头将沉淀捣碎。建议使用含有Thiourea ,Urea,NDSB-201或其它强溶解能力的去污试剂的缓冲液有利于沉淀的完全溶解。
注意事项:
1. 为提高石蜡包埋组织中蛋白质的回收效率,必须尽量减少在切片制作过程中甲醛固定时间,同时在石蜡包埋前彻底脱水,甲醛固定的时间越长,蛋白质的提取回收效率越低。
2. 尽量取用从石蜡包埋组织块中切取的薄片,或没有封闭到载玻片上的没有经过苏木精等染色的切片。
3. 材料越新鲜或甲醛固定时间越短,蛋白质的回收效率越高。
4. 提取试剂中含有含有刺激性的化合物,操作时要戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻,沾染皮肤 眼睛后,立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
5. 对于甲醛浸泡的组织样本,每次可以取5-10mg的组织样本,用双蒸水洗涤离心收集后后,直接从步骤4开始操作。
6. 提取的蛋白沉淀如果用于ELISA、RIA等免疫实验,可能需要先进行抗原修复程序,但是如果用Western Blot或Dot blot实验,一般情况下没有必要。
7. 本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
我公司的BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·细菌内毒素标准品(10EU/支)
编号:BTN140405
英文名称:Bacterial endotoxin standard
规格:10支
本品常用用作细菌内毒素阳性对照,外观为白色疏松海绵状固体。
储存条件:常温运输,室温阴凉处保存,有效期一年。
内毒素标准溶液的配制:
1. 溶解:取一支标准品,加入细菌内毒素检查用水 1.0mL,复溶后置旋涡混匀器上混匀15分钟,得到溶解即为10EU/mL的内毒素标准品溶液。如果需要其他浓度的内毒素溶液,可根据实验要求配制。
2. 稀释:方法如下(以0.1,0.25,0.5,1.0 EU/mL为例):
取上步配制的10EU/mL的内毒素溶液,稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液,以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液按下表稀释成0.1,0.25,0.5,1.0 EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。
表1内毒素标准溶液配制
| 内毒素浓度(EU/mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
| 加细菌内毒素检查用水(mL) | 0 | 0.5 | 0.75 | 0.9 |
| 加1EU/ml内毒素溶液(mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
注意事项:
1. 本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测,禁止用于注射、口服等。
2. 实验所用的器皿需经过处理,以除去可能存在的外源性内毒素,可以经250℃干烤至少60分钟处理,也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。
3. 稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟,放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。
BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销关键词:石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒,FFPE Total Protein Extraction Kit,BTN130888
SJ0727 Tris-HCl缓冲液(1mol/L,PH6.8)
Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 100ml
ARB14133 人SlIt2 检测服务
ARB12585 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)elisa检测 Rat matrix metalloproteinase 10,mmp-10 ELISA KIT
ARB12292 大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)含量分析 Rat anti-cardiolipin antibody igg,aca-igG ELISA KIT
精子形态学快速染色液(Diff-Quik法) 3×20ml|3×100ml
PY02-279 嗜冷菌计数琼脂(乳平板计数琼脂) 250克
BTN131129 植物种属鉴定PCR Mix Plant DNA Barcoding PCR Mix
BL1159 无内毒素质粒大量提取试剂盒
PY02-247 SIM动力培养基 250克
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N-*甲酰-L-酪*酰乙酯 D-Panthenol 3483-82-7
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BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销关键词:石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒,FFPE Total Protein Extraction Kit,BTN130888
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乙酸纤维素 Sodium 4-amino-1-naphthalenesulfonate 9004-35-7
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胃蛋白酶(猪胃粘膜) Silver acetate 9001-75-6
邻*二酚紫指示剂 100ml
偶氮脒类引发剂V59 Amprolium hydrochloride 13472-08-*(代"7")
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HC0001 细胞培养皿
F040101 牛血清白蛋白偶联克伦特罗 BSA-CLE
脑脊液蛋白定性检测试剂盒(酚法) 120T
ARB11138 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa方法检测 Human tumor necrosis factor α,tnf-α ELISA KIT
新霉素硫*(代"酸")盐 Azoviolet 1405-10-3
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购BTN130888型石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒现货促销。
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