一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销
产地：国产|进口
规格：30次
品牌：百奥莱博
编号：BTN100205
英文名：One-Stop DNA Native PAGE Pack
本品就是专门用于非变性PAGE的试剂。非变性PAGE电泳是研究SSCP-PCR(single-strand conformation polymorphism-PCR、单链PCR片段构象多态性)和凝胶滞阻(Gel Shift)的重要研究手段，因为在非变性PAGE中，DNA的迁移率除跟长短相关外，还跟其构象和结合的蛋白质相关。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备水和样品，十分方便。
2. 安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
3. 灵活，高浓度的丙*(代"烯")酰胺溶液可用于配制各种浓度的PAGE胶，分开提供的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺可用于配制各种交联度的PAGE胶。
4. PAGE电泳后可直接用于银染等后续试验。

产品组成：

 

成分	规格	保存
丙*(代"烯")酰胺	60g	室温
甲叉双丙*(代"烯")酰胺	2g	室温
TEMED	1.5ml	4℃，避光
过硫*(代"酸")铵(干粉)	1g	室温
非变性PAGE上样液，2×	1ml	4℃
10×TBE(BTN90313)	250ml	室温
说明书	1份

储存条件：常温运输，保存条件见上表，有效期一年。

使用方法：
用于SSCP-PCR分析的非变性PAGE电泳(其他应用请相应修改参数)

一、PAGE浓度的选择：最好使用浓度为5-12%的丙*(代"烯")酰胺胶，因为SSCP-PCR的扩增长度一般在150-200bp之间，而5%的PAGE的有效分辨范围为80-500bp、8%的PAGE的有效分辨范围为60-400bp、12%的PAGE的有效分辨范围为40-200bp。

二、PAGE交联度的选择：交联度越低，孔径越大，对DNA分子构象的变化越灵敏，SSCP分辨率越高，但过低则胶太软，不好进行电泳后的后续操作，所以一般选择1-2%的交联度(即丙*(代"烯")酰胺：甲叉双丙*(代"烯")酰胺在49:1到48:2之间)。

三、体积的选择：SSCP-PCR检测需要长约30-40cm的测序胶板，可以结合梳子的厚度，计算胶的体积。
操作：
1. 配制PAGE胶(这是配制100mL胶的用量，配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A：新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B：新鲜配制适当交联度29:1的30%的丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(AB溶液，下同)：在本产品提供的装有60 g丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和全部的甲叉双丙*(代"烯")酰胺，充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)，即得到30%的AB(29:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完，必须4℃避光保存。
C：配SSCP PAGE胶：在一个250mL的三角瓶中，先按下表的用量加入去离子水、30% AB溶液溶液和10×TBE缓冲液。丙*(代"烯")酰胺单体溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

PAGE胶浓度	各成分用量(单位：ml)			总体积(ml)
	去离子水	30%AB溶液	10×TBE缓冲液
5%	73.4	16.6	10.0	100
6%	70.0	20.0	10.0	100
7%	66.7	23.3	10.0	100
8%	63.3	26.7	10.0	100
9%	60.0	30.0	10.0	100
10%	56.7	33.3	10.0	100
11%	53.3	36.7	10.0	100
12%	50.0	40.0	10.0	100

注：有大量文献报道PAGE胶中加入5%-10%的甘油能提高某些位点的分辨率。如果选择加入10%的甘油，则减少去离子水的用量10mL，同时加入10mL甘油。
D：摇晃混匀。最好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应)，无条件也可以不脱氧。
E：加入500μL 10%APS和100μL TEMED，迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子，用1×TEB液冲洗加样孔。
I: 放4℃冰箱预冷30分钟-12小时。为了防止胶收缩，最好顶部加少量1×TBE缓冲液。预冷的胶有利于保持单链DNA的构型。
2. 将预冷的凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽中加入足够1×TEB电泳液。
3. 取3-5μl SSCP-PCR样品，加入等体积2×非变性PAGE上样液，85℃处理5分钟后冰浴。用前短暂离心后取2μl上样。
4.连接电源线，打开电源开关。如果PAGE中不含甘油，则使用25W的功率，电泳5-7小时(对3—40cm长的PAGE胶而言)。如果使用含甘油的PAGE，则使用8W的功率，电泳16-18小时。由于温度变化过大会改变DNA构型，所以电泳时最好能保持恒温。对不含甘油的PAGE，最好恒温在4℃、对含甘油的PAGE，最好恒温在25℃。
5. 终止电泳，取出凝胶进行后续的处理(如银染)。

疑难解答：
一、为何SSCP-PCR带型有复合条带？
原因之一：可能是残留的PCR引物跟单链的DNA结合形成迁移率不同的条带。解决方法是稀释PCR或电泳前将PCR产物进行纯化。
原因之二：可能是PCR产物用量过高，彼此复性。解决办法是将PCR产物稀释后4-8倍后使用。
二、如何提高电泳分辨率？
可以在配胶时加入甘油(终浓度为5%-10%)，因为甘油是弱变性剂，能部分展开DNA折叠结构，增加表面积，增加电泳时位移差异。但加入甘油后粘性变大，电泳速度变慢，因此只适合室温电泳使用，不要4℃电泳。如果条件允许，最好同时做加甘油和不加甘油的电泳实验。

关于一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
PY02-274  乳糖发酵管培养基  250克  
ARB10050 人Apelin 13(AP13)ELISA检测服务 Human apelin 13,ap13 ELISA KIT
ARB11886 人磷脂酰丝*酸(PS)Elisa方法检测 Human phosphatidylserine,ps ELISA KIT
ARB12715 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)elisa检测 Rat phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,ampk ELISA KIT
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法)   100T
BL1081 特级胎牛血清
ARB11497 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)含量测试 Human lipoarabinomannan,lam ELISA KIT
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
BTN90707 动植物总蛋白微量提取试剂盒 Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
PY02-377  菌种芽孢培养基  250克  
ARB11814 人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA代测服务 Human membrane cofactor protein,mcp ELISA KIT
微晶纤维素 Sodium 2-oxobutyrate 9004-34-6
ARB13036 小鼠卵巢癌标志物CA125含量测试 Mouse ovarian cancer marker-ca125 ELISA KIT
BL0901 FITC标记羊抗小鼠IgG抗体
*甲脒 L-Tryptophan 618-39-3
PY02-069  抗生素检定培养基Ⅶ号  250克  
一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销关键词：BTN100205,One-Stop DNA Native PAGE Pack,一站式DNA非变性PAGE电泳套装


·一管式病毒DNA提取试剂盒
编号：BTN3674
英文名称：One-tube virus DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取病毒(如HBV)DNA的产品，其原理是异硫*酸胍/LiCl溶液即能裂解病毒，又能沉淀DNA。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50 拷贝/mL。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
6.与PCR和荧光PCR 兼容。

试剂盒组成：

成分	规格
病毒DNA提取试剂	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1.在1.5mL 螺旋盖塑料离心管(最好不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2mL液体样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24,000g 冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL 病毒DNA提取试剂盒溶液，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
3. 振荡30秒混匀后加入0.7mL 异丙醇，振荡30秒混匀后，15000g室温离心15分钟。
4. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀，加入1.0mL 70% 乙醇，振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。
5. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒，移弃残留上清(残留的乙醇会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200μl超纯水，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象，如果溶于200μL 水而样品使用量不超过PCR 体系的1/2时，不溶物一般不会影响后续PCR反应。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
6.样品可以直接取适量用于PCR，也可保存于-20℃长期保存。

使用效果：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000 拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl 水中，取5μl进行荧光PCR(使用MJResearch的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。


一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销关键词：BTN100205,One-Stop DNA Native PAGE Pack,一站式DNA非变性PAGE电泳套装


·λDNA
编号：BTN90407A
英文名称：Lambda DNA
规格：5μg
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA，是一种常见的DNA底物，分子量为31.5×106Da/48502bp，浓度为200～500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

储存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

纯度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。

·Southern专用DNA Marker(生物素标记)
编号：BTN120654A
英文名称：Southern DNA Marker(Labeled by Biotin)
规格：20次
本产品是用生物素标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker，可以用做Southern杂交的Marker，便于准确确定杂交片段的大小。

产品特点：
1. 即开即用，非常方便。
2. 每个DNA片段显色强度均匀。
3. 如果探针用生物素标记，则必须用生物素标记的DNA Marker。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
3. 按常规方法电泳。
4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
5.转膜。
6. 按常规的方法杂交和检测生物素的方法检测。

我公司强烈推荐核酸电泳和回收系列产品，热情期待您的咨询选购一站式DNA非变性PAGE电泳套装现货促销。