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828
- 英文名:
RNase Inhibitor From Human
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货RNase抑制剂(人源)(40U/μL)促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货RNase抑制剂(人源)(40U/μL)促销
产地:国产|进口
规格:2500U
编号:BTN3290
英文名:RNase Inhibitor From Human
品牌:百奥莱博
本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor,其分子量为50 KD,能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性,Ki为3*10-14M,该反应是可逆的,通过尿素及硫基类试剂能够解离复合体,使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。
产品特点:
1. 抑制范围广,可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性,但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2.与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3.在广泛的pH范围(pH5-8)有活性。
4. 应用范围广,可以用于RT-PCR、cDNA 合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。
储存条件:低温运输,-20℃及保存,有效期一年。
使用方法:一般在有RNA的反应体系中加1-10U即可。
疑难解答:
Q:本产品抑制 RNase的Ki值是多少?
A:本产品是混合物,不能确定其Ki值。
Q:百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA,都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase,它们的主要区别何在?
A:一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC);后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容,故 RNA可以直接使用;后者会抑制很多后续反应,需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定,更耐热。
关于北京现货RNase抑制剂(人源)(40U/μL)促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
ARB10653 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪*酸激酶2(TIe-2)Elisa方法检测 Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and egf-like domains 2,tie-2 ELISA KIT
ARB13311 山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)Elisa分析 Goat P-Selectin/cd62p/gmp-140 ELISA KIT
F030809 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*BIOTIN
CYB164034 兔抗马IgG(1:500~1000)-HRP
PY02-181 山梨醇麦康凯琼脂基础 250克
001003 绵羊血清
D-天冬酰胺一水物 Chlorosulphonphenol S 2058-58-4或5794-24-1
BTN130985 免DNA提取PCR试剂盒 Cell Lysate PCR Mix
人工脑脊液(无菌) 500ml
ARB10805 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA代测服务 Human anti-thyroid microsome antibody,atma/tmab ELISA KIT
BTN130661 RecA蛋白 RecA
替卡西林* Florisil 4697-14-7
*检测试剂盒(邻甲*(代"酚")酞络合铜微板法) 100T
麦芽糖一水合物 Methyl orange 6363-53-7
BL0902 FITC标记羊抗猪IgG抗体
BTN60302 硫*(代"酸")卡那霉素干粉 Kanamycin Sulfate Powder
F030506 FITC标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*FITC
碘化* Phthalide 7681-11-0
PY02-046 葡萄糖肉汤 250克
ARB12273 大鼠红细胞生成素受体(EPOR)含量检测 Rat erythropoietin receptor,epor ELISA KIT
BL0830 HRP标记兔抗FITC抗体
北京现货RNase抑制剂(人源)(40U/μL)促销关键词:BTN3290,人源,RNase Inhibitor From Human,RNase抑制剂(人源)(40U/μL)
·DTT(蛋白级)
编号:BTN131053
英文名称:DTT,Protein Grade
规格:5g
本产品是用于还原蛋白质二硫键的水溶性试剂。维持单硫醇的还原状态并可定量还原二硫键。 使用DTT和Ellman 试剂可以特异、灵敏地分析二硫键。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·BCA法蛋白定量试剂盒
编号:BTN80815
英文名称:BCA Protein Assay Kit
规格:500次
本产品是基于BCA法(bicinchoninic acid,二奎啉甲*(代"酸")法)蛋白检测原理开发的蛋白质浓度测定产品,BCA法跟Lowry法的第一步完全相同,就是在碱性条件下,蓝色的Cu2+被蛋白质还原成紫色的Cu+。此反应类似Cu2+与Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2,双缩尿)发生的反应,故又叫Biuret反应(Biuret反应本省就可以测定蛋白质浓度,目前仍然是医院血液蛋白定量的方法)。第二步,Cu+与BCA发生反应形成水溶性的紫色化合物,通过分光在562nm处测定紫色化合物的量就可以精确定量蛋白质浓度。BCA 检测灵敏度比Biuret反应高100倍左右。

产品特点:
1.对各种常见的去污剂不敏感,但对Cu的还原剂和螯合剂比较敏感。
2.比Lowry法更加简单快捷,45分钟内完成测定。
3.试剂稳定,室温可以放置两年。工作液1 天内有效。
4.线性范围在 20~2000μg/mL。如果需要范围在0.1-10ug/mL,需要选用超敏BCA。
5.最小测量体积为1-20μL。
6.终产物稳定,变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7.可以检测最短到双肽,而Bradford法需要一定大小的蛋白质。
8.有常规(试管)和微量(96孔板)两种检测模式。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 2ml |
| BSA标准品(2mg/mL) | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存),有效期两年。
使用方法:
一:96 板操作模式
1.取一块96孔板,先进行编号(编号可以根据样品数增加),并按照下表加入BSA 标准,待测样品和溶解待测样品的缓冲液(可以用水替代):
| 编号 | BSA 标准(2ug/uL) | 待测样品(μL) | 样品缓冲液(μL) | 总体积(μL) | 蛋白含量(μg) |
| 0 | 0 | 0 | 20 | 20 | 0 |
| 1 | 1 | 0 | 19 | 20 | 2.0 |
| 2 | 2 | 0 | 18 | 20 | 4.0 |
| 3 | 4 | 0 | 16 | 20 | 8.0 |
| 4 | 8 | 0 | 12 | 20 | 16.0 |
| 5 | 12 | 0 | 8 | 20 | 24.0 |
| 6 | 16 | 0 | 4 | 20 | 32.0 |
| 7 | 20 | 0 | 0 | 20 | 40.0 |
| 样品1 | 0 | X | 补到20 | 20 | 未知 |
| 样品N | 0 | Y | 补到20 | 20 | 未知 |
2.计算BCA工作液需要量:根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.2mL BCA工作液的比例,计算所需BCA工作液的用量,然后加上10%损耗作为实际需要配制的量。例如:计算出需要5mL工作液,实际按不少于5.5mL的量配制。
3.配制BCA工作液:按50体积溶液A加1体积溶液B(50:1)的比例将二者充分混合,所得溶液即BCA工作液。比如:5mL溶液A+100μl溶液B。
注意:取用溶液A和溶液B前需要充分摇匀,溶液B非常容易形成沉淀,需要65℃加热溶解后才能使用。当把溶液B刚加入到溶液A中时,最初会出现淡绿色沉淀,轻微晃动沉淀即会消失,工作液最后成绿色,可以室温放置12 天,但需要将容器的盖子拧紧。
4.将10倍体积(即0.2mL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
5.37℃放置30分钟。
6.冷至室温,10分钟内完成后续测定,否则化学反应还在继续进行,使光吸收值慢慢升高,每10分钟会升高2.5%左右。
7.在562nm下比色测定样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定,可用接近的波长检测,如570nm。
8.将编号为0号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品,其读数变成零)中扣除。
9.以0-7 号样品的BSA含量(μg,见上表最右行)为横坐标,以样品的吸光值为纵坐标,绘出BSA的标准曲线。
10.再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后的值)标在标准曲线上,其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量,除以样品稀释液总体积(20μl),乘以样品稀释倍数即为样品浓度(μg/μL)。
二:试管测定模式
1、基本操作同上,只是操作改在编号的玻璃试管中进行,同时BSA 标准品(2ug/uL)的使用量从低到高改为0、5、10、20、40、60、80、100μL,样品的总体积从20μL 改为100μL,BCA工作液的用量从每个样品0.2mL 改为2mL。
三:注意事项
1.BCA法测定蛋白浓度时,吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以,如果蛋白质浓度较低,可以改在60℃孵育30分钟或更长。
2.待测样品浓度在20~2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3.在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响:
| 名称 | 在此浓度下不受影响 |
| Ammonium Sulfate | 1.5 M |
| Brij-35 | 5.0% |
| CHAPS | 5.0% |
| EDTA | 10mM |
| Hepes | 100mM |
| Glycine,pH2.8 | 100mM |
| Guanidine HCl | 4.0 M |
| Tween 20、60、80 | 5.0% |
| SDS | 5.0% |
| Sodium Acetate pH5.5 | 200mM |
| Sodium Chloride(NaCl) | 1.0 M |
| Sucrose | 40% |
| Sodium Hydroxide(NaOH) | 0.1 M |
| NP-40 | 5.0% |
| Triton X-100 | 5.0% |
| Urea | 3.0 M |
4.本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响,所以需确保EDTA浓度不高于10mM,二硫苏糖醇不高于1mM,β-巯基乙醇不高于1mM,没有任何EGTA,否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。
北京现货RNase抑制剂(人源)(40U/μL)促销关键词:BTN3290,人源,RNase Inhibitor From Human,RNase抑制剂(人源)(40U/μL)
·Pfu DNA聚合酶
编号:BTN51207
英文名称:Pfu DNA Polymerase
规格:100U
Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增,还可以用于DNA片段的粘转平反应。
产品特点:
1.它具有3´-5´聚合酶活性,跟常用的Taq DNA聚合酶一样,能够用于PCR反应。
2.与Taq DNA Polymerase不同的是,它还具有3´-5´外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
3.其出错率最低的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中最低的。
4.Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍维持90%以上活性。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 100U |
| 10×Pfu Buffer | 0.1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.按下列组份配制PCR反应液
| Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 0.5-1μL |
| 10×Pfu Buffer | 5μL |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 4μL |
| 模板DNA | 见下 |
| 引物1(10 uM) | 1μL |
| 引物2(10 uM) | 1μL |
| 灭菌蒸馏水 | Up to 50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng |
| 质粒DNA | 5-500pg |
| PCR回收片段 | 1-100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 94℃ | 3min | |
| 94℃ | 30sec | 30~50循环数 |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 2min | |
| 72℃ | 5min |
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
10×Pfu Buffer的组成:200mM Tris-HCl(pH8.8),100mM KCl,100mM(NH₄)2SO₄,500mM MgSO₄
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。
质控标准:
1.SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
2.无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。
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文献和实验, SUPERase.in, RIP 等几个知名品牌的 RNA 酶抑制剂都属于这个类型。Prime RNase Inhibitor 是一种全新的非人源的 RNase 抑制剂,和HPRI 一样,能够非共价结合并抑制 RNases A, B, C 类的 RNA 酶活性而不影响RNases T1, T2, H, U1, U2 和 CL3 的活性,因而不会干扰cDNA合成,SP6/ T7, Hela细胞提取物系统的RNA 体外转录,以及在兔网织红细胞裂解液或者是麦胚提取物中进行的体外翻译。应用范围:1.体外转录2.体外
. 真空离心干燥 3~5 分钟,或放在室温下使乙醇完全挥发掉。 12. 沉淀用30 μl DEPC-H2O溶解。如发现沉淀难溶,68 ℃处理 10 min。 13. RNA检测 (1)测定样品在260 nm和280 nm的吸光值 按1OD=40 μg/ ml RNA计算RNA的产量。OD260/OD280在1.8-2.0 。 (2)进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳确定RNA的完整性和污染情况。 低得率:A.样品裂解或匀浆处理不彻底;B.最后得到的 RNA 沉淀未完全溶解。
万蕊雪/施一公等再发Science开辟新「地图」,这几个领域将直接受益
site)和分支位点序列(BPS, Branch point sequences),同时又缺少像主要剪接体那样的特征性多聚嘧啶序列(PPT,polypyrimidine tract)。[1] RNA 剪接体缺陷是导致人类疾病的重要原因之一,据估计可能超过 60% 的疾病与 Pre-mRNA 剪接有关。 [3,4] 次要剪接体与疾病 U12 内含子仅占全部人源内含子的约 0.35%,目前已报道的越有 700-800 个基因,通常由一个 U12 内含子和多个 U2 内含子构成。目前发现的 U12 内含
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