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北京诺博莱德科技有限公司
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产品简介:
GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶,该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。 β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)简称为GUS染色液,其染色原理是适宜的反应条件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质,该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质,具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色,多用于转基因植物的GUS基因表达分析,该即用型试剂比常规GUS染色液操作简便。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
| 编号 名称 |
D6613 | Storage |
| 试剂(A):X-GlucSolution(50x) | 1ml | -20℃避光 |
| 试剂(B):GUSBuffer | 50ml | 4℃避光 |
| 使用说明书 | 1份 | |
操作步骤(仅供参考):
1、配制X-Gluc染色液:取适量的X-GlucSolution(50x)和GUSBuffer,按1:50比例 充分混匀,配制成X-Gluc染色液,如取X-GlucSolution(50x)加入到10mlGUSBuffer中,即配成10mlGUS染色液,该染色液最好现用现配,短期贮存可以4℃保存3天。
2、取适量待染叶片等组织加入适量GUS染色液,使GUS染色液完全浸没组织。
3、37℃孵育,随着孵育时间的延长,蓝色渐渐出现,当表达量较高时,GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
4、用70%乙醇脱去样本的叶绿素,一般样本浸没于乙醇,至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤,以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光学显微镜下观察,白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。
注意事项:
1、配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3天。
2、X-GlucSolution(50x)应避免反复冻融,否则染色效率会下降。
3、由于组织特异性等原因,蓝色颜色反应可能不完全一致,应注意摸索具体实验条件。 拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色;烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色前切成薄片(1-3mm);当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞,建议采购常规GUS染色液。
GUS染色液(即用型)
有效期:6个月有效。
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