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- NobleRyder
- D6610
- 北京
- 2025年11月20日
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99
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6个月
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
产品简介：
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等，其中最经典的是Feulgen法, 该法是一种经典的酶组织化学法。
NobleRyder Feulgen Stain 原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团，所以凡含有DNA的部位就呈紫红色。该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键，因此RNA用此法处理后则分解，所以该法不适用于证明RNA。
产品组成：
| 编号 名称 |
D6610 3×50ml |
Storage | |
| 试剂(A): Schiff Reagent | 50ml | 4℃ 避光 | |
| 试剂(B): SO2水 |
B1: 弱酸溶液 | 50ml | RT |
| B2: 亚硫酸盐溶液 | 50ml | RT | |
| 使用说明书 | 1份 | ||
自备材料：
1、蒸馏水、系列乙醇
2、恒温箱
福尔根DNA染色液
操作步骤(仅供参考)：
(一)石蜡切片染色
1、组织固定：Carnoy固定石蜡切片较好，10%福尔马林亦可，不宜采用Bouin固定液。
2、配制弱酸工作液: 按弱酸溶液:蒸馏水=1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。
3、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
4、入弱酸工作液，室温浸洗一下。
5、 切片入预热至60℃的弱酸工作液，孵育8min。
6、切片入室温的弱酸工作液中冲洗1min。
7、蒸馏水冲洗。
8、切片入Schiff Reagent，室温避光染色30~60min。
9、在上述染色过程中，配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亚硫酸盐溶液:蒸馏水=1:5:94配制，即取弱酸溶液1份、亚硫酸盐溶液5份、蒸馏水94份，充分混合，即配即用。
10、用新鲜配制的SO2水工作液洗切片3次，每次90s。
11、蒸馏水中洗净。经系列乙醇脱水。二甲苯透明并封片。
(二)冰冻切片染色
1、冰冻切片预处理：取1份乙酸、3份无水乙醇混合即为固定液，固定10min。
2、由无水乙醇脱水--逐级下行—蒸馏水。
3、配制弱酸工作液：按弱酸溶液:蒸馏水=1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。
4、余下步骤同上述石蜡切片染色。
染色结果：
| 细胞核内DNA | 红紫色 |
阴性对照： 将同样切片经上述步骤， 只有步骤5改为入室温弱酸工作液，孵育15min。结果为细胞核DNA阴性。
注意事项：
水解时间很重要，并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
| 固定液 | 水解时间(min) |
| Carnoy固定液 | 8min |
| Helly固定液 | 8min |
| Susa固定液 | 18min |
| 福尔马林 | 8min |
| Zenker液 | 5min |
注意Schiff Reagent的纯净程度，若变浅粉红亦可考虑使用，颜色变红则弃用。
去除切片上多余Schiff Reagent的方法以SO2水洗为好。
应做阴性对照试验。
福尔根DNA染色液
有效期： 6个月有效。
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文献和实验1个月（液体一次性使用，不回收） ·Fontana银液 冷藏：1个月（液体一次性使用，不回收） ·福尔马林 6个月 ·氯化金 6个月 ·硫代硫酸钠 6个月（液体一次性使用，不回收） ·核固红 2个月 Mallory（铁）特殊染色液的稳定性 ·盐酸 贮存液：1个月（液体一次性使用，不回收） ·亚铁
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。也宜用摇床，或手动晃动数次。E. 用PBS
类。铬酸水解DNA系将其戊糖转变为一种醛；亦可将糖类转变为醛。因此DNA和糖类不需经过常规PAS或Feulgen反应的预先处理即与Schiff试剂呈阳性染色。 铬酸的渗透力较低，对标本收缩轻微，经铬酸固定剂固定的组织像用重铬酸钾固定一样需彻底水洗，将组织中铬酸全部洗去，否则在脱水过程中，铬酸与酒精作用生成氧化铬的沉淀，使组织脆化，且不易于组织的着色。铬酸适合固定的浓度为0.5%～1%。 四氧化锇（OsO 4 ） 为微黄色结晶，通常密装于安瓿内出售，为强氧
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