DyLight 488标记亲和素说明书

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")DyLight 488标记亲和素说明书，我公司供应的抗体抗原品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：DyLight 488标记亲和素说明书
规格：100μl
英文名：DyLight488 Conjugated Avidin
品牌：百奥莱博
物理性状：液体
保存条件：频繁使用时置4℃，不常使用时置-20℃。注意避光。
有效期：一年。
荧光素：DyLight 488 carboxylic acid 最大吸收峰 493nm；最大发射峰518nm。
试剂内容：1ml DyLight 488 标记Avidin 含 1mg 亲和纯化 Avidin，0.01M PBS，1% BSA，0.01% Thimerosal。其中 Avidin 经化学修饰，等电点由 pH10 降为pH6.5。
使用方法：
DyLight 488 标记试剂稀释液：PBS 或 TBS 缓冲液，加入试剂级 BSA至 1%。使用上述稀释液，免疫荧光法按 1：200-800 稀释。具体的稀释度须自己预先确定。稀释后溶液建议现用现配，未用完的应弃置。
注意事项：请离心后，再使用。

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·WFDC2 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1488
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.WFDC2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
WFDC2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


DyLight 488标记亲和素说明书关键词：二抗,
品牌：百奥莱博,DyLight 488标记亲和素,ZN1989

ARB10612 人血红蛋白H(HbH)ELISA代测服务 Human hemoglobin h,hbh ELISA KIT
ARB11287 人*结合蛋白(CR)检测服务 Human calretinin,cr ELISA KIT
毛地黄皂苷 4-Aminoacetophenone 11024-24-1
57-13-6 Urea    尿素
D-(+)-二*甲酰酒石酸一水物 Potassium L-lactate 80822-15-7
PY02-184  色*酸培养基  250克  
ARB11737 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA检测服务 Human targeted ribonuclease, tr ELISA KIT
BTN81105 琼脂糖 Agarose
BL1350 低分子量蛋白MARKER
E0617 抗凝裂解山羊血
H1301 大鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)
6104-59-2 考马斯亮蓝 Coomassie brilliant blue R-250
代谢性骨疾病固定液(pH7.35)   500ml
868272-85-9 3,3-二*基联*(代"*")*(代"胺") 4HCL DAB-4HCL 
16672-87-0 乙*(代"烯")利 Ethephon
ARB11150 人肿瘤相关抗原(TAA)定量分析 Human tumor-associated antigen,taa ELISA KIT
ARB13322 山羊催乳素(PRL)酶联免疫定量检测 
DyLight 488标记亲和素说明书关键词：二抗,
品牌：百奥莱博,DyLight 488标记亲和素,ZN1989

胞苷 Murexide 65-46-3
BTN80601 非冻型细菌RNA保存液 Bacterial RNALOCKER
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 Diethylamine hydrochloride 29836-26-8
吲唑 Deoxy-Big CHAP 271-44-3
ARB11770 人腺病毒IgM(ADV-IgM)定量分析 Human adenovirus igm,adv-igM ELISA KIT
二*砜 Alcian Blue 8GX 127-63-9
硫*(代"酸")鱼精蛋白副凝固定检测试剂盒(3P凝固法)   60T
BL0829 HRP标记兔抗生物素抗体
ARB13437 鸡甲状旁腺激素(PTH)含量测试 Chicken paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
BL0940 生物素化人IgG抗体
蔗糖咪唑溶液  0.4mol/L|1.1mol/L|1.65mol/L|2.25mol/L 100ml
PY02-148  DNA酶甲基绿琼脂基础  100克  
SJ0192 Dextran T-500 葡聚糖 T-500
ARB12218 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)尿液中含量检测 Rat platelet factor 4,pf-4 ELISA KIT

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