AEC显色试剂盒(红色)促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应AEC显色试剂盒(红色)促销，我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：AEC显色试剂盒(红色)促销
规格：1盒
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：ZN1963
保存：频繁使用时置 4℃，不常使用时置-20℃。
有效期：一年。
3 *9乙基卡唑(AEC)是过氧化物酶重要的显色剂之一。显色呈鲜艳的红色，可用于免疫组化及各种斑点检查法。AEC的缺点是溶于有机溶剂，须用水溶性封片剂封片。
试剂盒中内容：
显色剂 A：AEC×20倍浓缩液，3ml。
显色剂 B：×20倍醋酸盐浓缩缓冲液(含 H2O2，PH5.6)，3ml。
使用方法：
1．在过氧化物酶的检测完成以后，TBS 或 PBS 充分洗涤，一般 5分钟×4次。
2．按 1ml 蒸馏水加 1 滴显色剂Ａ和１滴显色剂Ｂ，混匀,加至标本上。一般避光显色 10-30分钟。若无背景出现则可继续显色。
3．蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时甲基蓝 3-5分钟或不含酒精的苏木素(Mayer"s)复染。
4．水溶性封片剂封片，也可简单地用甘油封片，显微镜观察。
注意事项：不得使用含酒精的苏木素复染。

AEC显色试剂盒(红色)促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
FMOC-L-异亮*酸 o-Phenanthroline hydrochloride 71989-23-6
NF-201 羊抗人APO-A血清
透明质酸染色液   2×50ml
ARB10852 人抗*调素特异抗体(CAM-Ab)ELISA代测服务 Human anti-calmodulin specific antibody,cam-ab ELISA KIT
8002-43-5 L-α-Phosphatidylcholine 卵磷脂
ARB11496 人脂多糖结合蛋白(LBP)检测服务 Human lipolysaccharide binding protein,lbp ELISA KIT
BTN130526 细菌专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for Bacteria
PY08-042  亮绿乳糖胆盐肉汤 10ml  10支/盒，用于大肠菌群，大肠杆菌的测定
BTN130819 Bouin固定液 Bouin Solution
间*基*甲*(代"酸") Trifluralin 99-05-8
司他夫定 DL100 3056-17-5
钼酸铵负染色液  3% 100ml
DL-高*丙*酸 2′-dI 1012-05-1
BTN81217 微量蛋白沉淀试剂盒 Mini Protein Precipitation Kit
ARB10167 人TU3A蛋白(TU3A)elisa检测说明书 Human tu3a protein ELISA KIT
ARB10997 人泛素蛋白(Ub)elisa检测操作说明书 Human ubiquitin,ub ELISA KIT
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SJ0730 大鼠外周血淋巴细胞分离液
磷脂酶A2 Silver sulfate 9001-84-7
ARB12739 小鼠I型胶原N末端肽(NTX)Elisa定量检测 Mouse cross linked n-teloPeptide of type i collagen,ntx ELISA KIT
甲基绿指示剂   100ml
ARB10235 人γ谷*酰转移酶(GGT)酶标法分析 Human gamma glutamyl transpeptidase,ggt ELISA KIT
3150-24-1 对硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷 PNPG
ARB13802 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)检测服务 Guinea pig ovalbumin specific igg,ova sigG ELISA KIT
1404-93-9 Vancomycin   盐*(代"酸")万古霉素
亮抑肽酶 2-Nitroso-1-naphthol 103476-89-7
无*基酵母氮源[不含硫*(代"酸")胺] γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide
ARB11413 人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)Elisa分析 Human haptoglobin,hpt/hp ELISA KIT
C0501 马血清(无菌过滤)
ARB13389 牛溶菌酶Lysozyme 检测服务 
ARB11139 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA代测服务 Human tnf α converting enzyme,tace ELISA KIT
58-22-0 Testosterone 睾酮(睾甾酮)
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·Bcl-2 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0122
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse,rabbit,dog
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.Bcl-2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Bcl-2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

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