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北京百奥莱博专业生产供应SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels)优惠价,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels)优惠价
品牌:百奥莱博
编号:ZN1888
产地:国产|进口
规格:1盒
产品规格:可制 30-50块凝胶
主要成份:
1.30% Acr-Bis(29:1)100ml
2.1.5M Tris-HCl,pH8.8 100ml
3.10% SDS 5ml
4.Ammoniμm persulfate(过硫*(代"酸")铵)0.5g
5.TEMED 1ml
6.1M Tris-HCl,pH6.8 15ml
产品保存:
1M Tris-HCl,pH8.8、10% SDS、Ammonniμm persulfate(过硫*(代"酸")铵)和 1M Tris-HCl,pH6.8 室温保存。30% Acr-Bis(29:1)和 TEMED 4℃避光保存。过硫*(代"酸")铵配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
产品说明:
凝胶配制试剂盒提供了配制 PAGE 凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制 PAGE 胶了。凝胶配制试剂盒不仅可用于配制 SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE 凝胶。本试剂盒约可配制 30-50 块常规大小的PAGE胶(即聚丙*(代"烯")酰胺凝胶)。
注意事项:
1.过硫*(代"酸")铵配制成 10%溶液后,应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。
2.TEMED 易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节 TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3.TEMED 有腐蚀性,请注意防护。
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BTN130675 核糖核酸酶HII RNase HII
BL0864 羊抗人C3免疫血清 0.5ml
ARB10114 人Jo1抗体/抗组*酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)酶联免疫定量检测 Human jo-1 antibody,jo1/hrs ELISA KIT
异硫*酸胍溶液(5mol/L,RNase free) 100ml
ARB11333 人胎球蛋白A(FETU-A)Elisa分析 Human fetuin a,fetu-a ELISA KIT
半乳糖氧化酶 Stachyose hydrate 9028-79-9
ARB13892 猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV)检测服务 Porcine transmissible gastroenteritis virus antibody,tgev ELISA KIT
ARB14110 人肌肉生长抑制素(MSTN)ELISA代测服务
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ARB12947 小鼠血栓前体蛋白(TpP)定量分析 Mouse thrombus precursor protein,tpp ELISA KIT
ARB13609 兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)elisa测定使用说明书 Rabbit retinol binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
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D-来苏糖 4-Methoxysalicylaldehyde 1114-34-7
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·Interleukin 5R/IL-5R mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0783
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.Interleukin 5R/IL-5R mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
Interleukin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels)优惠价关键词:百奥莱博,SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels),ZN1888
维生素B1检测试剂盒(荧光光度法) 50T
ARB10323 人内皮型一氧化*(代"氮")合成酶(eNOS)含量测试 Human endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
ARB12399 大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)尿液中含量检测 Rat retinol binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
CAPS转移缓冲液(小于10KD) 500ml
放线菌*(代"素")D Furaltadone 50-76-*(代"0")
BTN100810 超快蛋白银染试剂盒 Rapid Silver Stain for Protein
BL1106 *苄青霉素储存液(100mg/ml)
C0601 山羊血清(无菌过滤)
D-(+)-苹果酸 Methyl red sodiu*(代"m") salt 636-61-3
10%APS 10%过硫*(代"酸")铵 10×1ml
ARB10491 人白介素4(IL-4)酶联免疫定量检测 Human interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
ARB12897 小鼠生长激素释放肽ghrelIn(GHRP-GhrelIn)elisa检测说明书 Mouse growth hormone releasing Peptide-ghrelin,ghrp-ghrelin ELISA KIT
2-磺基*甲*(代"酸")酐 Potassium pyroantimonate 81-08-3
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