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- 2026年04月22日
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AlphaLISA
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revvity
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几乎所有靶点都可以通过 Alpha 技术快速、简便地检测，它是传统 ELISA 的优化替代方案。
适用靶点包括生物标志物、细胞因子、磷酸化蛋白、受体-配体相互作用、生化酶、第二信使水平、DNA、RNA、蛋白质、蛋白-蛋白相互作用、肽、糖类和小分子等。
选择适合您的均质 Alpha 检测方案：
AlphaLISA™ — AlphaLISA 产品适用于在血清、血浆、细胞培养上清液或细胞裂解液中，灵敏、定量、可重复且操作简便地检测感兴趣分子。您可从丰富的即用型试剂盒中选择，或使用 Alpha 工具箱自行构建检测方案。
AlphaLISA™ SureFire Ultra™ — 蛋白磷酸化是一个动态过程，受到激酶和磷酸酶级联反应的精密调控，这种调控对于多种细胞过程至关重要，并被认为是多种疾病的关键机制。AlphaLISA SureFire Ultra 检测方法可在细胞实验中稳健、可靠地定量特定的磷酸化事件，且比 Western Blot 更省时高效。
Alpha技术的优势
- 操作简便： 采用均相检测流程，无需洗涤或分离步骤
- 检测快速： 多数应用中 3 小时内出结果
- 灵敏度高： 可检测低至飞克级（femtogram）目标物
- 动态范围广： 可覆盖 4–5 个数量级
- 样本兼容性强： 适用于血清、血浆、脑脊液（CSF）、组织提取物、细胞培养上清液、细胞裂解液等多种样本类型
检测原理
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文献和实验Zong, H., Zhang, S., Shang, X., Jiang, H., Zhao, Z., Chen, S., Wang, X., Wang, Y., Jiang, Y., Li, X., Tan, L., Liu, P., Lv, Q., & Li, Y. (2023). Development of an AlphaLISA assay for sensitive and accurate detection of influenza B virus. Frontiers in medicine, 10, 1155551.
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
（一）补体 检测血清补体水平或补体活性时需要从受检者采血及分离血清。做补体结合试验时多采用豚鼠血清作为实验用补体的来源。因为补体在体外极易衰变，所以检测补体活性的血清标本和作为补体试剂的血清必须新鲜。 受检者一般做静脉采血，在动物可做心脏采血。血清分离后应及时使用，最好在当日用完。必须保存时采用小量分装的办法，置－70℃下可保存数月，避免反复冻融。冻干制品可长期保存，但其活性都不同程度地比新鲜血清降低。 以豚鼠血清作补体来源时，应考虑到个体差异。为了确保血清
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