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| 异构十三醇聚氧乙烯醚乳化剂E-1302,E-1304,E-1306,E-1308,E-1310,E-1312 | ||||||||||||||||||||||||||||
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文献和实验完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析
1. 前言 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 已经被广泛应用于生 物科学中。结合十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE ) 和酶解消化,它提供了一种通过肽质量指纹谱(PMF ) 的快速、灵敏和准确鉴定蛋白质的方法通常 PMF 给出 10%~40% 的序列覆盖率。这样的覆盖率对于蛋白质鉴定来说已经足够,但它可能还不足以用来区分高度相似的蛋白质异构体。蛋白质异构体/同工酶广泛存在,它们通过 mRNA 的可变剪切或多基因家族生成。虽然它们在细胞中催化
RNA Secondary Structure Analysis Using RNAstructure
. and Bartel, D.P. 1996. Phylogenetic analysis of tmRNA secondary structure. RNA 2:1306‐1310. Xia, T., SantaLucia, J. Jr., Burkard, M.E., Kierzek, R., Schroeder, S.J., Jiao, X., Cox
种方法都有其各自的缺陷。Merten等通过构建一基于λPL调节的反转衰减T7 RNA多聚酶表达盒阐明了这一问题。可以通过在启动子和编码T7多聚酶的基因之间插入三个串联排列的转录终止子来削弱T7多聚酶的基础表达水平。在诱导的情况下,噬菌体λ来源的nutL依赖的抗终止功能也可以协同来阻止转录终止[74]。来源于E.colirrnB rRNA操纵子的转录抗终止区已被用于某些表达载体如pSE420。该载体应用trc启动子[75]。其基本原理是使得转录通过重度二级结构区,从而减少宿主RNA 多聚酶引起的转录
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