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- 文献和实验
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-20
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3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
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1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验在蛋白-蛋白互作研究中,荧光互补技术因其直观、原位、无需裂解细胞等优势,成为越来越多科研人员的首-选。 但面对BiFC(双分子荧光互补) 和LCA(萤光素酶互补实验) 这两项技术,很多人会有疑问:它们有什么区别?我的实验该选哪一个? 今天,我们结合金开瑞荧光系列实验服务的实际经验,把这两种技术讲清楚。 一、BIFC技术 01 BiFC:看蛋白互作发生的“位置” 技术原理 双分子荧光互补(BiFC)技术将荧光蛋白(如YFP)切成N端和C端
②能自主复制,是能独立复制的复制子(autonomous replicon)。一般质粒DNA复制的质粒可随宿主细胞分裂而传给后代。按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类:严紧控制(stringent control)型质粒的复制常与宿主的繁殖偶联,拷贝数较少,每个细胞中只有1个到十几个拷贝;另一类是松弛控制(relaxed control)型质粒,其复制宿主不偶联,每个细胞中有几十到几百个拷贝。每个质粒DNA上都有复制的起点,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制,不同质粒
有以下几点要求: ①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力。 ②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好。 ③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。 ④容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。 ⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。 常用的载体有质粒,噬菌
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