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MiaoLingBio
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淼灵生物
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文献和实验【求助】请教大家一个关于报告基因质粒瞬时转染与报告基因表达的问题,问题比较长,谢谢
少数。 质粒确实不会整合到基因组上,但是它表达出来的蛋白(也就是你的转录因子)是可以转运到核内的(只要你的蛋白含有入核序列NLS)就可用结合到调控序列并启动荧光素酶表达。 其实所有的转录因子不都是这样子的吗?它们在细胞质中形成成熟的蛋白之后才转到细胞核内行使起功能。所以说他们的原理是类似的。 蛋白和基因是有所区别的~~~ lsdcfhyj 我还是没有明白,可能是我的问题没问清楚,我的报告基因质粒上含有转录因子对应的调控
1.慢病毒载体概述 慢病毒载体(Lentivirus)是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体,是逆转录病毒的一种,基因组是RNA,其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。可利用逆转录酶将外源基因整合到基因组中实现稳定表达,具有感染分裂期与非分裂期细胞的特性。 慢病毒基因组进入细胞后,在细胞浆中反转录为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。整合后的DNA转录成mRNA,回到细胞浆中,表达目的蛋白;或产生小RNA。慢病毒介导的基因
数为C,菌液浓度为2×109细胞/ml菌液,则在每ml菌液中质粒DNA含量为(2×S×C×10-6)μg 二.人体细胞核 酸理论含量 基因组 DNA 6 pg/cell 总RNA 10-30 pg/cell 三.人全血DNA理论含量 5-10×106 细胞/ml Blood 30-60μg DNA/ml Blood 四.RNA理论含量 Cell (107) NIH
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