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文献和实验【求助】质粒有两个复制起始点，怎么复制呢？（red重组，pKD46质粒）
mnidr 我现在在做基因敲除，用的是red重组系统，pKD46质粒上携带有敲除所需的蛋白。pKD46质粒上有两个复制起始点Origin of Replication：repA101ts & oriR101 ；repA101ts是温度敏感型复制起始点。 有几个问题请教： 1.大家有用过这个pKD46的吗？oriR101是温度敏感型复制子还是条件诱导型复制子啊，我在网上查到它是温度敏感型复制起始点，我很不理解，为什么已经有一个温度
敲除系统，氨苄青霉素和卡那霉素抗性基因并在卡那霉素抗性基因两边带有 FRT 位点，为重组转化提供筛选标志 pKD13 基因敲除质粒 Kan 序列：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AY048744.1 pKD46 基因敲除质粒 Chl 主要用于原核生物的基因敲除，Red
和RecBCD蛋白组成，在基因敲除时必须以环状质粒存在）、结合转化敲除系统及温度敏感型质粒敲除系统等可供选择。 2 FLP-FRT系统和Cre-loxP系统 这两个系统都是位点特异性重组酶系统，其中FLP-FRT源于酿酒酵母，Cre-loxP源于F1噬菌体。两个系统的基本原理类似。以Cre-loxP系统为例，该系统含有两种成分：第一个部分是一段长34 bp的重组酶识别的DNA序列（loxP），其中含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列；第二个是Cre
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