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MiaoLingBio
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淼灵生物
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1管
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
的工业化前景. IMPACT-TWIN系统包括两个大肠杆菌表达载体――pTWIN1,pTWIN2.之所以叫做Twin,原因在于pTWIN的设计在多克隆位点两端都各有一段intein和CBD,排列如下：几丁质结合蛋白域―intein1―MCS―Intein2―几丁质结合蛋白.这个巧妙的设计有3重便利：N-端,C-端或者N-端和C-端同时融合短的内含肽序列.想做N端融合,你可以将目的基因替换MCS―Intein2―几丁质结合蛋白,如果想做C 端融合表达,就可以将目的基因替换MCS前面的几丁质
了不同的内含肽2，pTWIN1用Mxe GyrA 内含肽(198 aa)作为内含肽2；而pTWIN2使用的是Mth RIR1 内含肽(134 aa)。然而，pTWIN1 和pTWIN2含有相同的多克隆位点，这样简化了将目的基因插入两个载体来选择最佳表达质粒的操作。pTWIN-MBP融合了麦芽糖蛋白，可用作对照载体和克隆载体(将目的基因克隆到pTWIN-MBP1 NcoI-SacI酶切位点之间，会在蛋白产物的N-端增加3个氨基酸，C-端增加23个氨基酸。)IMPACT系统利用的是T7启动子进行转录
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