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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
- 库存:
1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
可以得到可溶性的蛋白,因为可溶的蛋白才可以行使功能,而且纯化起来也不像包含体复性那么复杂.pMAL™系统采用了 tac启动子(由lac启动子的-10区和trp启动子-35区融合而成,参考:如何做原核表达)和malE翻译起始信号使克隆基因获得高效表达. pMAL载体含有编码麦芽糖结合蛋白(Maltose Binding Protein,MBP)的大肠杆菌malE基因,其下游的多克隆位点便于目的基因插入,表达N端带有MBP的融合蛋白. 此系统的pMAL载体除了含有氨苄霉素抗性,还含有LacZ
Binding Protein,MBP)的大肠杆菌malE基因,其下游的多克隆位点便于目的基因插入,表达N端带有MBP的融合蛋白。此系统的pMAL载体除了含有氨苄霉素抗性,还含有LacZα基因,目的基因的插入导致其失活,通过X-gal平板可进行蓝白斑筛选。pMAL载体都含有一段编码蛋白酶识别位点的序列,融合蛋白纯化后,通过Factor Xa(X),Enterokinase (E)或 Genenase™ I (G)可将目的蛋白与MBP切割分离。如果不想在切割后留下任何外源氨基酸可以在设计引物时引入XmnⅠ
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