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大量
- 英文名:
CD62L (L-selectin) MicroBeads, mouse
- 供应商:
埃克森(北京)科技有限公司
- 保存条件:
4度保存
名称:CD62L (L-selectin) MicroBeads, mouse
货号 : 130-049-701
厂家:德国美天旎
类别:小鼠T细胞及亚群磁珠分选试剂(T cells and T cell subsets,Mouse)
小鼠 CD62L(L-选择素)微珠被开发用于从淋巴结或脾脏中阳性选择或去除 T 细胞亚群。
1.1 MACS分离原理首先,用CD62L(L-选择素)微珠、小鼠对CD62L+细胞进行磁性标记。然后,将细胞悬浮液加载到置于 MACS® 分离器磁场中的柱上。磁性标记的 CD62L+ 细胞保留在柱上。未标记的细胞穿过,并且该细胞部分中的 CD62L+ 细胞被耗尽。从磁场中取出柱后,磁性保留的 CD62L+ 细胞可以作为阳性选择的细胞部分洗脱。
1.2 背景信息 CD62L(L-选择素)小鼠微珠已被开发用于基于 CD62L 抗原表达的细胞分离。 CD62L 在大多数胸腺细胞和外周白细胞(包括 B 细胞和 T 细胞、中性粒细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞)上高度表达。淋巴细胞和中性粒细胞上 CD62L 的表达在细胞激活时下调。 CD62L 表达水平在初始 T 细胞上较高,但在效应/记忆 T 细胞上较低。
1.3 应用 ● 表达小鼠CD62L 抗原的细胞的正选择或去除。 ● 从先前分离的T 细胞亚群中分离或消除CD62L+ 初始T 细胞。可以使用 MACS CD4+ 或 CD8+ T 细胞分离试剂盒(小鼠)从淋巴组织中分离 T 细胞亚群。
1.4 试剂和仪器要求 ● 缓冲液:用 autoMACS 冲洗溶液 (# 130-091-222) 按 1:20 稀释 MACS BSA 库存溶液 (# 130-091-376),制备含有磷酸盐缓冲盐水 (PBS)、pH 7.2、0.5% 牛血清白蛋白 (BSA) 和 2 mM EDTA 的溶液。保持缓冲液低温(+2 至 +8 °C)。使用前对缓冲液进行脱气,因为气泡可能会堵塞色谱柱。
注意:EDTA 可以用其他补充剂替代,例如抗凝柠檬酸葡萄糖配方-A (ACD-A) 或柠檬酸磷酸葡萄糖 (CPD)。 BSA 可以被其他蛋白质替代,例如小鼠血清白蛋白、小鼠血清或胎牛血清 (FBS)。不建议使用含有 Ca2+ 或 Mg2+ 的缓冲液或培养基
有关磁珠的知识
MACS磁珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。磁珠直径约有50nm,比细胞小200多倍,体积为细胞的百万分之一,光学显微镜下不可见。磁珠由多聚糖和氧化铁组成,无毒性,对细胞无损伤,可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容,不会影响细胞的光散射特性;磁性标记只占用20-30%的结合位点,不影响细胞的荧光抗体标记。此外,MACS磁珠可以最大限度地避免细胞活化;无需解离磁珠,可以直接进行后续实验:如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。
MACS磁珠主要有三种:直标磁珠、间标磁珠、多选磁珠。其中间标磁珠有抗免疫球蛋白磁珠、抗生物素磁珠或链霉亲和素磁珠、抗荧光素磁珠。多选磁珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种磁珠。这种磁珠通过特殊的方式与抗体偶联,在第一次阳性分选完成后,与细胞结合的多选磁珠可以被解离试剂剪切下来,阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。
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