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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
249
- 英文名:
PAGE protein staining kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货可逆微量蛋白染色试剂盒批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货可逆微量蛋白染色试剂盒批发
产地:国产|进口
英文名:PAGE protein staining kit
规格:250ml|1000ml
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质,它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度(ng级水平或者更高),但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方,蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成,因此蛋白条带仍旧保持透明无色,在黑色的背景下,就可以清晰见到透明的蛋白条带。
试剂盒组份(250ml):
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml
产品特点:
1.电泳后采用两个简单步骤,15分钟内完成全部过程。
2.环保染料,完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带,灵敏度为传统方法的10倍以上(纳克级或者更高)。
4.可逆染色,完全不影响蛋白性质,不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱(切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用)、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上,不退色,缩小,蛋白质不扩散,一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。
操作步骤:
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟,然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中,根据胶大小倒入适量的染色液(确保胶都浸没在染色液内,20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了),摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟,5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液,加入20-25ml 的显色液,立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟(将透明培养皿放在一个黑色(暗)背景上观察条带出现情况,此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带,不要显色时间过长,过长反而会降低分辨率)。
3) 看到满意条带后,用清水冲洗1-2 分钟后,放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液,摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全,最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱,Western blot 等操作,或者可以再用传统方法永久染色。
问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看,条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况,一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶,可以用脱色液部分脱色(胶脱色后,还可以再次反复染色)。
3. 蛋白浓度太低了,检测上样蛋白的浓度。
●干胶后,条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法,干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了,因此不可以做成干胶。如果要长期保存,可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。
储存条件:室温避光,有效期12个月。
本品别名:PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)|可逆微量蛋白染色试剂盒|超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒
更多有关北京现货可逆微量蛋白染色试剂盒批发的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·荧光定量用第一链反转录预混合液
编号:ALH264
英文名称:First strand RT-PCR premix for fluorescent quantitation
规格:20μl×50次
本品为一管式反转录预混Mix,5×RT MasterMix 中含有反转录第一链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA 和RNase-Free H2O 即可进行反应。使得cDNA 的合成更加的方便快捷,特别适合cDNA 合成以后的两步法Real Time PCR 检测。
试剂盒组分:
5 ×RT MasterMix————————0.2ml
RNase free H2O—————————1ml
产品特点:
1.体系配制简单:本产品为预混Mix形式,只需加入模板RNA和水便可以进行反应。
2.反转录效率高:特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比,反转录效率高。
3.反转录速度快:只需42℃,20 min即可完成cDNA第一链的合成。
4.通读复杂模板:能够用于GC含量高,二级结构复杂的RNA模板,合成cDNA片段长度最高可达12 kb。
5.后续兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)
编号:ALH090
英文名称:A large number of Endotoxin-free Plasmid Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒适用于不含内毒素质粒的高纯度制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,粗提物通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素,然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————77ml
溶液P2—————————————77ml
溶液N3—————————————77ml
内毒素清除剂——————————25ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速, 方便,从100-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
3.独特工艺配方清除内毒素,内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),细胞转染效果极佳。也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、N3 的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货可逆微量蛋白染色试剂盒批发关键词:超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒,PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色),可逆微量蛋白染色试剂盒
·植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
编号:ALH036
英文名称:Plant RNA Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织细胞总RNA,是在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性极其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| 裂解液RLT | 20ml | 50ml |
| 裂解液CLB | 8ml | 8ml |
| 裂解液RLT Plus | 10ml | 25ml |
| 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
| 漂洗液RW | 5ml | 10ml |
| RNase-freeH2O | 10ml | 10ml |
| PLANTbalb | 2ml | 5ml |
| 基因组DNA清除柱和收集管 | 20套 | 50套 |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
6. 仔细阅读补充说明2,如果裂解液CLB效果好,可以联*(代"系")我们单独订购裂解液CLB,或者购买试剂盒的时候,指明将裂解液RLT换成裂解液CLB。
储存条件:室温,有效期6个月。
北京现货可逆微量蛋白染色试剂盒批发关键词:超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒,PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色),可逆微量蛋白染色试剂盒
白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")紫微板法) 100T
克霉唑 Creatine Monohydrate 23593-75-1
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