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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
814
- 英文名:
One Step qRT-PCR Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存
英文名:One Step qRT-PCR Kit
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:ALH195
本试剂盒是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂,用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶提高了耐热性,可以在42-50℃反转录,提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。
试剂盒组份(50次):
2 XqRT-PCR Mix (含Sybr Green I)-——————1.25ml
OneStep Enzyme Mix—————————————100μl
RNase free H2O———————————————1.5ml
适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;部分高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。
注意事项:
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液(Master Mix,其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用Enzyme Mix时,分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有高浓度的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I,保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
5. 不同的片段,所需最佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
6. 只能使用特异性引物,不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
本品别名:一步法荧光定量RT-PCR试剂盒|一步法qRT-PCR试剂盒|一步法RT-qPCR试剂盒
更多有关北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·唾液DNA收集提取试剂盒
编号:ALH178
英文名称:Saliva DNA collection, preservation,transport and extraction Kit
规格:10次|50次
本试剂盒针对唾液样本中的DNA 进行收集、保存、运输、纯化。可提供无疼痛、非侵入性的方法,患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品,受测者排斥性低,婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单,受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量高达110μg/2mL唾液。
试剂盒组份(50次):
保存液———————————2ml×50
细胞裂解液—————————50ml
杂质沉淀液—————————85ml
DNA溶解液——————————20ml
5ml采集管——————————50个
产品特点:
1.非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险,并增加了取检的便利性,可由受检者自行取样。
2.仅需2ml的唾液样本,即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
3.采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。
唾液样品收集步骤:
1. 用清水漱口1~2 次,然后吐掉。
2. 漱口后等候至少5 分钟方可采集唾液,期间不要进食、饮用各种饮料。
3. 将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5ml 采集管中,直至2ml 刻度位置。(不可将痰液吐到收集管中,若唾液不足,可做口舌运动,促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2ml 唾液采集量内,采集过程必须在30 分钟内完成)
4. 将等体积2ml 保存液全部倒在5ml 唾液采集管中,充分颠倒混匀后旋紧盖子。
唾液DNA提取步骤(2ml唾液量举例,可按比例放大缩小每次提取的唾液量):
1. 将保存液/唾液混合物放置于50℃ 水浴中至少1 小时或50℃ 空气孵箱至少2 小时。
2. 转移4ml 混合物(2 ml 唾液加2 ml 保存液)到一个15 ml 或者50 ml 的离心管。
3. 加入1ml 裂解液和10 μl RNase A 溶液(10mg/ml). 高速涡旋振荡10 秒后室温放置10分钟。
4. 加入1. 7 ml 杂质沉淀液到上述裂解混合物中。
5. 高速涡旋振荡25 秒,充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。
6. 2500g离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密,可以冰上放置5分钟,然后重复步骤6。
7. 仔细转移上清(含有DNA)到一个新的15 ml 或者50 ml 的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5ml 异丙醇。(唾液DNA 含量较低时,加入40μl Glycogen 20mg/ml可能提高一些产量)
8. 轻柔颠倒混匀50 次。
9. 2000g 离心3 分钟, 此时一般可在管底看到白色的DNA 沉淀。
10. 倒弃上清, 倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA 沉淀。
11. 2000g 离心1 分钟, 仔细倒去上清(沉淀很松,注意不要把DNA 沉淀倒掉了)。
12. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟(不要干过头,也不要残留乙醇)。
13. 加入250μl -400μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,轻弹管壁混匀。
14. 可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要超过一小时),然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA,中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
15. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃ 或者-80℃。
北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存关键词:一步法荧光定量RT-PCR试剂盒,一步法qRT-PCR试剂盒,一步法RT-qPCR试剂盒
·M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)
编号:ALH257
英文名称:M-MuLV Reverse Transcriptase
规格:10KU|10KU×5
本品是使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本酶浓度200 units/μl,合成cDNA片段长度最高可达12kb。
试剂盒组分(10KU):
M-MuLV RTase(200U/μl)———————10000U
5×RT Buffer————————————500μl
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
储存条件:-20℃。
北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存关键词:一步法荧光定量RT-PCR试剂盒,一步法qRT-PCR试剂盒,一步法RT-qPCR试剂盒
ARB13622 兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa检测说明书 Rabbit cholest erolester transfer protein,cetp ELISA KIT
PC3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反转录PCR试剂盒)
Tween20/TBS溶液(20×TBST,pH7.5) 500ml
ARB11309 人促卵泡素(FSH)elisa检测操作说明书 Human follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
磷酸*二*七水物 Piperine 7782-85-6
PY02-201 放线菌肉汤培养基 250克
*基琼脂糖凝胶6FF(高分辨率) Wright′s stain
HC0132 玻璃纸
诱惑红 D-Asparagine Monohydrate 25956-17-6
ARB12926 小鼠半乳糖6硫*(代"酸")酯酶(GAl-6S)血清中含量检测 Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,gal-6s ELISA KIT
嗜酸性粒细胞染色液 2×100ml
甲*(代"酸")* Barbituric acid 141-53-7
ARB10615 人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)elisa检测 Human fibrinoPeptide a,fpa ELISA KIT
尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏微板法) 100T
BTN60602 柱式植物DNAOUT Column Plant DNAOUT
F040312 小鼠IgA抗原 Mouse IgA
ARB14225 猪口蹄疫抗体(FMD-Ab)酶联免疫定量检测
BL1358 非变性组织/细胞裂解液
BTN90708 即用型高保真PCR试剂盒 Instant HiFi PCR Mix
BL1203 Mayer 苏木素染液(免疫组化)
离子交换剂Ⅴ Zearalanone
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购北京现货一步法荧光定量RT-PCR试剂盒库存。
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文献和实验actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR:Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括:10μl 2×One-step SYBR premixture,7.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA,1μl One-step
a,操作步骤请参考说明书。 目的基因:小鼠管家基因β–actin,山东大学提供样品基因。 cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA。操作步骤参照试剂盒说明书。 一步法荧光定量PCR: Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit 20μl反应体系包括:10μl 2×One-step SYBR premixture,7.2μl RNA Free Water, 0.4μl
码RNA?mRNA还有不翻译的RNA呢。应该说转录水平指的是RNA水平,而蛋白应该叫翻译水平?我们这里就特指编码蛋白的mRNA的量的检测吧!方法:很多很多,我们常用的也就是RT-PCR和northern(实际上我也只知道他们,丢人啊),但是RNA没保护分析在国外很常用,也有半定量的功能,一次性试剂盒还能以此将一个表达簇一起分析,例如NFkB的转录激活谱中的8个常见基因。至于dot blot和原位杂交之流则实属于吃力不讨好,不知所云,骗人玩玩的啦,dot blot的最大贡献是发展到了反向dot blot
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