猪骨髓单个核细胞分离液库存

用淋巴细胞分离液分离单个核细胞

  用淋巴细胞分离液分离单个核细胞   1 ）分离外周血中的单个核细胞（ PBMC ）   1． 抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含 5 ～ 10IU/ml 肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心 500 × g 20 分钟。此时离心管中形成 5 层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是 PBMC ，淋巴细胞分离液层和最下面的红细胞层之间是粒细胞

实验：用淋巴细胞分离液分离单个核细胞

1）分离外周血中的单个核细胞（PBMC） 1．抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是PBMC，淋巴细胞分离液层和最下面的红细胞层之间是粒细胞层，又成为棕黃层。 2．吸去最上层的血浆，收集血浆层和淋巴细胞分离液交界

脾脏单个核细胞分离方法及注意事项

脾脏（spleen）位于上腹部左后侧，体积较大，长条形，是体内最大的淋巴器官，也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞，是机体发生特异性免疫应答的场所。 1    原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2    方法 1）无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加入适量的分离液，将脾脏放入细胞筛中，置于分离液中进行研磨（具体