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外周血单个核细胞（PBMC）分离方法及注意事项

外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。 1    原理 单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其它细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重超过1.080，单个核细胞的比重为1.070左右，血小板为1.030左右。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Ficoll （2）取抗凝外周血（全血）与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。外周血，PBS，淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 （3）水平离心 400 g 成×30 分钟（可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整） （4）离心后可看见管内分为三层，上层为血浆和 PBS，下层主要为红细胞和粒细胞，中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，主要就是单个核细胞，包括淋巴细胞与单核

细胞密度梯度分离介质Ficoll：人外周血单个核细胞的分离

单个核细胞: 原理：人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell, PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形状和比重与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞比重较大，为1.092左右，而淋巴细胞和单个核细胞比重为1.075左右。利用密度在1.077±0.001g/L之间近于等渗的淋巴细胞分离液作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集。血浆和血小板由于密度较低, 故悬浮于分层液的上部；红细胞与粒细胞由于密度较大, 故沉于分层液的底部；PBMC密度稍低于分层