北京大鼠红细胞分离液厂家

骨髓单个核细胞分离方法及注意事项

核细胞分离开来。 2    方法 1）  无菌条件下抽取骨髓于含抗凝剂的采血管内，将骨髓与生理盐水或PBS溶液按等比例混匀，备用。 2）  按照稀释骨髓：细胞分离液比例为3:2的比例，缓慢将稀释骨髓液加入到细胞分离液上层，需保持液面分界清晰。 3）  800g，室温，离心 20min-30min（注：设置较慢的加速度和减速度，如果有十档，设为第三档）。 4）  小心吸取骨髓单个核细胞层（即白膜层）并转移至15mL离心管中。离心结束后，管内液面从上至下依次为无细胞骨髓液层、骨髓单个核细胞层、分离液层和红细胞

脾脏单个核细胞分离方法及注意事项

方法见示意图1）。 图1 脾脏研磨方法示意图 2）将悬有脾脏细胞的分离液立即转移入无菌离心管中，在上层覆盖适量的RPMI 1640培养基，且需保持液面分界清晰。 3） 800g，室温，离心 20min-30min（注：设置较慢的加速度和减速度，如果有十档，设为第三档）。 4） 离心结束后，吸弃RPMI 1640培养基，小心吸取脾脏单个核细胞层（即白膜层）并转移至15mL离心管中。离心结束后，管内液面从上至下依次为RPMI 1640培养基层、脾脏单个核细胞层、分离液层和红细胞层（见图

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Ficoll （2）取抗凝外周血（全血）与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。外周血，PBS，淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 （3）水平离心 400 g 成×30 分钟（可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整） （4）离心后可看见管内分为三层，上层为血浆和 PBS，下层主要为红细胞和粒细胞，中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，主要就是单个核细胞，包括淋巴细胞与单核