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规格:200ml
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文献和实验,4 ℃ ,避光。抗体浓度配制如前所述。 ⑥PBS洗3次后,用0.5%甲醛固定。方法如前。 (3)用Ficoll—Hypaque 梯度离心法分离出单个核细胞:用此法可以分离骨髓细胞、淋巴结、扁桃体捣碎后的单细胞悬液等。血液标本应有抗凝剂。取血到分离不能超过6h。 ①抗凝全血4~20ml,用等量PBS或Hanks液稀释。 ②稀释血8或40ml置于15或50ml离心管内,4或10ml Ficoll—Hypaque(或者等量的其它分离液,比重为1.007)从离心管底部轻轻加入
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1、肿瘤细胞培养问题:问:我养的肿瘤细胞,传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢?我总觉得细胞形态不好,但长的还挺快!答:初代培养的细胞在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止。组织和细胞在培养中生命期如何,这要看细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况
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