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名称:北京虎骨髓内皮祖细胞分离液价格厂家
编号:TH600
规格:2×200ml
产地:国产|进口
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文献和实验骨髓单个核细胞(Bone Marrow Mononuclear Cells,BMMNCs)是一群混合细胞,其中绝大多数是早幼粒细胞、早幼红细胞、成熟B细胞、T细胞和单核细胞等,还含有少量的干细胞,包括间充质干细胞、造血干细胞和内皮祖细胞等,它们密度相近,因此可通过密度梯度离心法从骨髓液中分离出来。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同,在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个
min(根据血液样本量确定离心条件,建议先摸索一下条件以达到最好的分离效果);离心后可见试管内血液清晰的分为4层,上层为血浆层,第二次为白色淋巴细胞层,第三层为透明分离液层,底层为红细胞层; 用吸管将第二层的淋巴细胞层小心的吸出收集到另 1 试管,用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS )清洗 2 遍,每次 250 g 离心 10 min; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整细胞浓度至 1x107/mL 备用。 四、 骨髓细胞样本制备 a)常规骨髓
。 二、单克隆抗体制备流程 (一)动物的选择与免疫 多采用6-12周龄SPF级雌性Balb/c小鼠。 免疫方法取决于所用抗原的性质。 免疫流程同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。 (二)细胞融合 · 细胞融合关键: · 细胞比例为1:10-1:5 · 融合过程操作要轻柔 · PEG厂家、批次、作用时间、温度控制 · 缓慢终止细胞融合 · 培养用优质胎牛血清 融合后细胞培养:注意细胞
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