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人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书

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  • 上海抚生
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  • 2025年07月14日
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      人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书

    • 细胞类型

      A类

    • 肿瘤类型

      详见说明书

    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      46

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 年限

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    • 运输方式

      低温冷藏

    • 器官来源

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    • 是否是肿瘤细胞

    • 细胞形态

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    • 免疫类型

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    • 相关疾病

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    • 英文名

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    • 规格

    人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书周期的概念:
    细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
    细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
    FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
    将培养基置于 37 °C水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之, 移入无菌操作台内。取出冷冻管, 立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿, 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部, 移入无菌操作台内。
    细胞名称 人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书
    形态特性 上皮细胞样

    生长特性 贴壁生长 
    特征特性 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白;表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体;该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
    培养条件 MEM-EBSS:
    Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  
    传代方法 1:
    3传代,2-3天传一代  
    传代情况 C76
    冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
    支原体检测 阴性 
    STR
    同工酶 同工酶鉴定
    染色体
    使用权限 A类
    人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书细胞常规说明:
    培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
    冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
    细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
    传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
    特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
    人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书操作流程与注意事项
    1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室 
    2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
    3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
    人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书注意事项:
    1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
    2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
    3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
    4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
    5、定期检测下列项目:5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。5.3.无菌操作台内之airflow压力,定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6.水槽可添加消毒剂(Zephrin1:750),定期更换水槽的水
    6、粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但最好也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,细胞娇弱,放置时间不宜过长。
    7、开紫外线照射台的时候,就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后,温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生,有的常年不清洗,里面很脏,容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后,最好找个毛巾擦干上面的水。
    规格:96T/48T人抗磷壁酸抗体(TA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit进口/原装

    规格:96T/48T人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒英文名称:Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA Kit特价促销
    规格:96T/48T人抗磷脂酰丝氨酸抗体(APSA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit进口/分装
    规格:96T/48T人抗流行性出血热病毒抗体IgG (EHF)ELISA试剂盒英文名称:Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody,EHF IgG ELISA Kit进口/分装
    规格:96T/48T人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody,EHF IgM ELISA Kit进口/分装
    规格:96T/48T人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒英文名称:Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISA Kit特价供应
    VEGFR-3/FLt-4 血管内皮细胞生长因子受体-3(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg

    Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
    Rhesus antibody Rh PCGF3/RNF3 环指蛋白3抗体 规格 0.2ml
    CEACAM1 Kit Human 人 CEACAM1 / CD66a ELISA配对抗体 ELISA
    TUSC2 英文名称: 血小板源性生长因子A相关蛋白2抗体 0.2ml
    CLEC5A 英文名称: C型凝集素结构域家族5成员A抗体 0.2ml
    Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
    ELISA Kit for Human Syntaxin-1A大鼠乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒,英文名:LTF ELISA KitELISA Kit for Human Aquaporin-5小鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒,英文名:PGF ELISA KitELISA Kit for Corticosterone小鼠金属硫蛋白2(MT-2)ELISA试剂盒,英文名:MT-2 ELISA KitELISA Kit for Human CD59 glycoprotein小鼠多肽YY(PYY)ELISA试剂盒,英文名:PYY ELISA KitELISA Kit for Human Cytotoxic T-lymphocyte protein 4小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒,英文名:β-glucosidase ELISA KitELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 10小鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)ELISA试剂盒,英文名:PECAM1 ELISA KitELISA Kit for Human Dentin sialophosphoprotein小鼠早期生长应答因子2(EGR2)ELISA试剂盒,英文名:EGR2 ELISA Kit

    ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor alpha-induced protein 3大鼠激肽释放酶9(KLK9)ELISA试剂盒,英文名:KLK9 ELISA KitELISA Kit for Human Gamma-enolase小鼠微管蛋白β1(TUBβ1)ELISA试剂盒,英文名:TUBβ1 ELISA KitELISA Kit for Human Ferritin heavy chain小鼠亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒,英文名:CYPA ELISA KitELISA Kit for Human Galanin peptides小鼠激活T-细胞核因子1(NFATC1)ELISA试剂盒,英文名:NFATC1 ELISA KitELISA Kit for Human High mobility group protein B2小鼠泛素结合酶E2A(UBE2A)ELISA试剂盒,英文名:UBE2A ELISA KitELISA Kit for Human Interleukin-4 receptor subunit alpha小鼠白介素20(IL20)ELISA试剂盒,英文名:IL20 ELISA KitELISA Kit for Human Interleukin-18小鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)ELISA试剂盒,英文名:CEBPβ ELISA Kit
    人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书SOSSC 英文名称: 单链DNA结合蛋白相互作用蛋白1 0.2ml

    EMAP2 英文名称: 内皮单核细胞激活肽2抗体 0.2ml
    神经纤毛蛋白-2抗体 Anti-NRP-2 0.1ml
    Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 荧光素标记抗猪水肿素(O139)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
    Rhesus antibody Rh phospho-ODF2(Ser796) 磷酸化尾部结构蛋白抗体 规格 0.1ml
    Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
     

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    相关实验
    • HepG2 细胞传代

      大多数朋友说推荐培养液为DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我们这里用1640加10%新生牛血清,效果也不错。DMEM不容易观察,有时候等DMEM黄了的时候,细胞已经严重缺乏养料,1640颜色变化比较明显,也比较符合细胞当时的情况。细胞置于5%CO2、37度培养,细胞生长较快,根据你留在瓶里细胞的数量,50%两天后传代一次。0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,该细胞容易抱团,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,观察细胞形态变化,细胞变圆时,倒掉胰酶,加入培养液,吹打重悬

    • HepG2转染的方法讨论

      要去除内毒素,plasmid:lipo约为1:0.5-1:5。实际上采用说明书的推荐量就很好,1:2.5 4,用前自己好好看一遍说明书,哈哈 yangea认为: HepG2细胞的确相对于CHO等细胞而言转染效率比较低,但也只是相对。据我们实验室的经验,用lipofectamine 2000转染HepG2完全没有问题,无论是瞬时转染还是稳定转染,也无论是转一个质粒还是共转染两个质粒(转两个以上没有试过)。但有些问题需要注意一下:

    • HepG2转染的相关问题

      担心。不需要用电转,磷酸钙法也可以有40-50%的操作上主要注意:1,细胞铺板时的状态很重要,应该在铺板前尽量消化为单细胞悬液,trypsin+EDTA充分吹打即可2,转染前1天铺板,待转染时密度刚好达到80-90%,不能太低,但是也不能长过(细胞成团,堆积)。最好是刚刚长满,此时还在对数生长期3,加入的质粒要去除内毒素,plasmid:lipo约为1:0.5-1:5。实际上采用说明书的推荐量就很好,1:2.54,用前自己好好看一遍说明书,哈哈丁香园网友yangea认为:HepG2细胞的确相

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