- ¥2600 - 6875
- PNABIO
- CP01-50
- 美国
- 2025年07月16日
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cp01-20/cp01-50/cp01-200/cp02
| 规格： | cp01-20 | 产品价格： | ¥2600.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | cp01-50 | 产品价格： | ¥2600.0 |
| 规格： | cp01-200 | 产品价格： | ¥6125.0 |
| 规格： | cp02 | 产品价格： | ¥6875.0 |
Cas9 protein, in complex with guide RNA, offers benefit for CRISPR/Cas9 technology over plasmid or mRNA transfection. The biggest benefit is that you can make RNP complex that is ready to work in vivo. Cas9 protein is short lived (about 24 hours of half life in cells), thus minimize the off-target effects and mosaicism. You can also easily test the activity of guide RNA in vitro by a simple cleavage assay. In addition, Cas9 protein is pretty stable, and activity confirmation is much easier compared to mRNA. Lastly, it is active in more broad range of organisms such as nematodes, insects, plants, and non-typical model systems as it does not require transcription or translation.
Cas9 protein offered by PNA Bio is conjugated with NLS, and it is injection/transfection ready form.
Cy3-Cas9 can be an easy enrichment of the cells that are transfected with CRISPR/Cas9 complex.
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文献和实验(其中N为任意碱基)。这对于精确的基因编辑来说是一个明显的障碍——sgRNAs的长度是有限的，因此如果在基因组中没有PAM序列接近我们想要修改的位置，这可能根本就不可能。不出所料，许多研究都集中在扩展Cas9蛋白识别的PAMs序列上。Cas9的许多面貌事实证明，PAM并不是一种保守的特性——它对不同细菌种类的Cas9蛋白有不同的表现。另外一种Cas9可以用于基因组编辑已经被证明过几次了。在2013年的一篇早期CRISPR基因组编辑文章中，张峰、Luciano Marraffini及其同事描述了来自嗜
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
pLV-Cas9Nick-Neo 我们现提供 4 种表达 Cas9 蛋白的慢病毒载体，您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1）抗生素选择：Puromycin 或 G418 用嘌呤霉素筛选比较快，仅需 4-7 天即筛选出阳性细胞。G418 筛选需要 7-14 天左右。此外不同的细胞对抗生素的敏感度差别很大。最好在开始实验前对细胞进行抗生素敏感度测试，以选择合适的抗生素种类，确定筛选浓度。 2）Cas9 蛋白选择：Cas9 和 Cas9
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