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Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片

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      Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片

    • 细胞类型

      A类

    • 肿瘤类型

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    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      31

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 年限

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    • 运输方式

      低温冷藏

    • 器官来源

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    • 是否是肿瘤细胞

    • 细胞形态

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    • 免疫类型

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    • 物种来源

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    • 相关疾病

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    • 组织来源

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    • 规格

    细胞名称 Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片
    形态特性 上皮样
    生长特性 贴壁生长 
    特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
    培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418 
    传代方法 1:2~1:4传代;每周2~3次。
    传代情况 C3
    冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
    支原体检测 培养法(-) 
    STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,13;D12S391:17,18;D13S317:13,13;D16S539:12,12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16,16;D5S818:12,12;D6S1043:18,18;D7S820:8,9;D8S1179:13,13;FGA:22,23;Penta E:11,11;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类
    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片操作流程与注意事项
    1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室 
    2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
    3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片细胞常规说明:
    培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
    冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
    细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
    传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
    特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片周期的概念:
    细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
    细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
    FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
    将培养基置于 37 °C水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之, 移入无菌操作台内。取出冷冻管, 立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿, 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部, 移入无菌操作台内。
    规格:96T/48T大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称:Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit特价促销

    规格:96T/48T大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒英文名称:Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit进口/原装
    规格:96T/48T大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒英文名称:Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit进口/分装
    规格:96T/48T大鼠血管紧张素Ⅱ转化酶(ACEⅡ)ELISA试剂盒英文名称:Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ ELISA Kit进口/分装
    规格:96T/48T大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒英文名称:Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit特价供应
    规格:96T/48T大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒英文名称:Rat Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit进口/原装
    Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A) 抑制基因抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

    Anti-APPL1 APPL1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
    Rhesus antibody Rh phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 规格 0.1ml
    山羊抗小鼠 IgM/HRP 0.1ml 美国Jackson公司分装
    VEGFB167 英文名称: 血管内皮生长因子B167 0.1ml
    Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 英文名称: 畸形表皮自调节因子1抗体 0.2ml
    Anti-APPL1 APPL1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
    人纤维胶凝蛋白3(FCN3)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)ELISA试剂盒,英文名:NPTX1 ELISA KitELISA Kit for Human Trypsin-1大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒,英文名:Cys-C ELISA KitELISA Kit for Human Platelet endothelial cell adhesion molecule大鼠CD68分子(CD68)ELISA试剂盒,英文名:CD68 ELISA KitELISA Kit for Human Relaxin-3大鼠着丝粒蛋白E(CENPE)ELISA试剂盒,英文名:CENPE ELISA KitELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 2大鼠拓扑异构酶Ⅱ(TOP2)ELISA试剂盒,英文名:TOP2 ELISA KitELISA Kit for Human Sphingosine kinase 2大鼠内皮型一氧化氮合酶(NOS3)ELISA试剂盒,英文名:NOS3 ELISA KitELISA Kit for Human TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 1大鼠核糖核酸酶A3(RNASE3)ELISA试剂盒,英文名:RNASE3 ELISA Kit

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    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片STK38 英文名称: 丝酸/苏酸蛋白激酶38抗体 0.2ml

    ET-1 英文名称: 内皮素1抗体 0.1ml
    非受体型酪氨酸蛋白激酶抗体 Anti-SYK 0.1ml
    Anti-TIMP-1/FITC 荧光素标记金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
    Rhesus antibody Rh phospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格 0.1ml
    phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相关死亡促进因子抗体Multi-class antibodies规格: 0.5mg
    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;231-Cas9-546图片注意事项:
    1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
    2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
    3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
    4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
    5、定期检测下列项目:5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。5.3.无菌操作台内之airflow压力,定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6.水槽可添加消毒剂(Zephrin1:750),定期更换水槽的水
    6、粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但最好也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,细胞娇弱,放置时间不宜过长。
    7、开紫外线照射台的时候,就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后,温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生,有的常年不清洗,里面很脏,容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后,最好找个毛巾擦干上面的水。

     

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