酵母质粒小量抽提试剂盒

 酵母质粒小量提取试剂盒(Yeast Plasmid Mini Preparation Kit)是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。
      无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。
      试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。
      由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。
      每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。
      使用酵母质粒小量抽提试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。
包装清单：
产品编号    产品名称    包装
D0029-1    酶解缓冲液    10ml
D0029-2    溶液Ⅰ(悬浮液)    15ml
D0029-3    溶液Ⅱ(裂解液)    15ml
D0029-4    溶液Ⅲ (结合液)    20ml
D0029-5    溶液Ⅳ (洗涤液)    18ml (第一次使用前每瓶加入27ml无水乙醇)
D0029-6    溶液Ⅴ (洗脱液)    3ml
D0029-7    RNase A (100mg/ml)    15μl
D0029-8    Lyticase    1管
D0029-9    Lyticase配制液    1.2ml
D0029-10    小抽质粒纯化柱及废液收集管    50套
—    说明书    1份
保存条件：
      D0029-8需-20℃保存，其余室温保存，一年有效。D0029-8为粉末，短时间4℃存放不影响其活性。D0029-8配制成Lyticase溶液后4℃可以保存1个月，-20℃可以保存6个月。
酵母质粒小量抽提试剂盒注意事项：
      第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液Ⅰ(悬浮液)中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
      第一次使用前在每瓶溶液Ⅳ(洗涤液)中加入27ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
      第一次使用前吸取1ml Lyticase配制液到Lyticase粉末中，完全溶解后即为Lyticase溶液。配制好的Lyticase溶液4℃可以保存1个月，-20℃可以保存6个月。如需-20℃保存，最好能适当分装。Lyticase溶液配制后或冻存后再溶解可能会出现轻微混浊，属正常现象，请混匀后使用。
      温度较低时，溶液Ⅱ和溶液Ⅲ可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。溶液Ⅱ请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
      溶液Ⅱ使用完后，一定要盖紧瓶盖，防止被空气中二氧化碳酸化。
      溶液II有强碱性，溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和Lyticase对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
      本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
      废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。