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人胚肾细胞;293 [HEK-
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详见说明书
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书
A类
上海抚生
20
贴壁生长
低温冷藏
否
株
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书周期的概念:细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于 37 °C水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之, 移入无菌操作台内。取出冷冻管, 立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿, 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部, 移入无菌操作台内。细胞名称 人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书形态特性 上皮样生长特性 贴壁生长 特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:10~1:20传代,每2~3天换液1次。传代情况 P20冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;同工酶 染色体 使用权限 A人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书细胞常规说明:培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书操作流程与注意事项1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室 2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书注意事项:1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。5、定期检测下列项目:5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。5.3.无菌操作台内之airflow压力,定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6.水槽可添加消毒剂(Zephrin1:750),定期更换水槽的水6、粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但最好也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,细胞娇弱,放置时间不宜过长。7、开紫外线照射台的时候,就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后,温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生,有的常年不清洗,里面很脏,容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后,最好找个毛巾擦干上面的水。Oleuropein 橄榄苦苷 32619-42-4 橄榄苦甙 20mg/支Lobetyolin 党参炔苷 136085-37-5 党参炔甙 10mg/支Carnosic acid 鼠尾草酸 639426 20mg/支Rosmarinic acid 迷迭香酸 20283-92-5 20mg/支Glycitin 黄豆黄苷 40246-10-4 黄豆黄甙 20mg/支Glycitein 黄豆黄素 40957-83-3 20mg/支Daidzin 大豆苷 552-66-9 大豆甙 20mg/支Daidzein 大豆苷元 486-66-8 大豆甙元;黄豆苷元 20mg/支Genistein 染料木素 446-72-0 染料木黄酮;金雀异黄酮 20mg/支Genistin 染料木苷 529-59-9 5,7-三羟异黄酮-7-糖苷 20mg/支Imperatorin 欧前胡素 482-44-0 20mg/支Isoimperatorin 异欧前胡素 482-45-1 20mg/支Polygalacic acid 远志酸 22338-71-2 20mg/支Senegenin 远志皂苷元 2469-34-3 20mg/支Rebaudioside A 莱苞迪甙A 58543-16-1 莱苞迪苷A 10mg/支Baicalin 黄芩苷 21967-41-9 黄芩甙 20mg/支Scutellarin 野黄芩苷 27740-01-8 野黄芩甙;灯盏花乙素;灯盏花素 20mg/支Baicalein 黄芩素 491-67-8 黄芩苷元; 黄芩黄素 20mg/支Fraxetin 秦皮素 574-84-5 秦皮亭;白蜡树内酯 20mg/支Esculin 秦皮甲素 531-75-9 20mg/支6,7-Dihydroxycoumarin 秦皮乙素 305-01-1 20mg/支Chlorogenic acid 绿原酸 327-97-9 20mg/支 1-咖啡酰奎宁酸 20mg/支1,5-Dicaffeoylquinic acid 1,5-二咖啡酰奎宁酸 30964-13-7 20mg/支人 IFNAR1 / IFNAR ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: IFNAR1人 CD82 / KAI-1 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: CD82人 2B4 / CD244 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: CD244人 KLK3 / Kallikrein 3 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: KLK3人 Cystatin SN / CST1 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: CST1大肠杆菌 stx2B / Shiga toxin II subunit B ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: E. coli 英文名称: Shiga toxin II subunit B人 NGF / NGFB ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: NGF人 XPNPEP2 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: XPNPEP2人 RELT / TNFRSF19L ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: RELT小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Mouse 英文名称: CA8人 IL-16 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: IL16人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: ICOSLG人 EphB6 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: EPHB6人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书人 CIB2 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: CIB2人 CD300C ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: CD300C人 CD171 / N-CAML1 / L1CAM ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: L1CAM人 SULT2B1 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: SULT2B1小鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Mouse 英文名称: EPCAM人 IGFBP7 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: IGFBP7人 FGFR2 / CD332 ELISA配对抗体 产品类型: Kit 种属: Human 英文名称: FGFR2
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