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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
蛋白胨水(色氨酸肉汤)
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
- 规格:
20支
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 蛋白胨水(色氨酸肉汤) | 蛋白胨水(色氨酸肉汤) | LM01 | 20支 | 30元 |
| 产品说明及用途:.用于沙门氏菌、O157菌、志贺氏菌、肠杆菌科、大肠埃希氏等生化鉴定,需配套Kovacs靛基质试剂使用 | ||||
用途:
用于沙门氏菌、O157菌、志贺氏菌、肠杆菌科、大肠埃希氏等生化鉴定,需配套Kovacs靛基质试剂使用
试验方法:
将培养物接种蛋白胨水,36 ℃±1 ℃培养24 h±2 h后,加Kovacs靛基质试剂(此试剂需另行购买)
0.2 mL~0.3 mL,上层出现红色为靛基质阳性反应。
简述培养基制备的要求使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
蛋白胨水(色氨酸肉汤)为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),蛋白胨水(色氨酸肉汤)先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
蛋白胨水(色氨酸肉汤)注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验法 图2 细菌纯培养划线方法 (二) 钓菌和纯培养:观察菌落,选单个菌落,标记后,钓取目的菌落,如图2之一方法接种于普通琼脂斜面上,37℃培养24h。 (三)生化实验 1、糖发酵实验:原理。将糖发酵管甩至两端,标记后折断,每组将1.2菌接种于两套糖发酵管中,倒立37℃培养24h。 2、靛基质实验:原理。每组将2、3号菌接入蛋白胨水培养基中,37℃培养4天后,加入靛基质 试剂 ,观察结果,
后,再划下一区域(约占1/4面积),此为第二区。 4、第二区划完后可不烧灼接种环,用同样方法划第三区,划满整个平皿。 5、划线完毕,将平板扣入皿盖并作好标记,置37℃温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况,注意是否分离出单个菌落,并记录菌落特征(如大小、形状、透明度、色素等)。 二、液体培养基接种法 用途:凡肉汤、蛋白胨水,各种单糖发酵均用此法接种。可以观察细菌不同的生长性状、生化特性以供鉴别之用。 操作方法: 右手执笔式握住接种环,灭菌冷却后取单个
的鉴别,如奇异变形杆菌、普通变形杆菌、沙雷菌属和阴沟肠杆菌等到能液化明胶,肠杆菌科中的其它细菌很少液化明胶。有些厌氧菌如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外,许多假单胞菌也能产生明胶酶而使明胶液化 吲哚试验(靛基质试验) (1)原理:某些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨水中的色氨酸产生吲哚,当加入吲哚试剂(对二甲氨基苯甲醛)后则形成红色的玫瑰吲哚。 (2)培养基:蛋白胨水培养基。
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