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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
贮存温度:2~8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Rainbow pre-stained protein Marker
- 库存:
大量供应
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 规格:
50T/606T
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取样本量100ul。
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =103.3%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物组织、红细胞以及各种培养细胞、各种水产等,效果均佳。
彩虹预染蛋白Marker(10-170KD)所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为636nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、酶促反应:按说明操作加入样本100l和混合试剂,37℃准确反应10分钟
2、加R7,3500转/分,离心10分钟,取上清
3、定磷:取上清液加入定磷剂,室温静置2分钟加终止剂
4、636nm波长,1cm光径,比色
技术参数:
本试剂盒保存期:6个月。贮存温度:2~8℃,特别提醒R4需放在-20℃以下冷冻保存。
参考文献:
1. Kok Poh Loh, Jia Qi, Benny Kwong Huat Tan, et al. Leonurine Protects Middle Cerebral Artery Occluded Rats Through Antioxidant Effect and Regulation of Mitochondrial Function. Stroke, 2010, 41:2661-2668.
2. Lei Liu, Yan Liu, Jie Cui, et al. Oxidative stress induces gastric submucosal arteriolar dysfunction in the elderly. World J Gastroenterol, 2013,19(48): 9439-9446.
3. Qifeng Zhao, Lan Shao, Xingti Hu, et al. Lipoxin A4 Preconditioning and Postconditioning Protect Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Rats. Mediators of Inflammation, Volume 2013, Article ID 23135, http://dx.doi.org/10.1155/2013/231351.
4. Gen-Xiang Mao, Ling-Di Zheng, Yong-Bao Cao, et al. Antiaging Effect of Pine Pollen in Human Diploid Fibroblasts and in a Mouse Model Induced by D-Galactose. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, Volume 2012, Article ID 750963. doi:10.1155/2012/750963.
5. Shao-Hua Liu, Ke Ma, Xin-Rong Xu, et al. A single dose of carbon monoxide intraperitoneal administration protects rat intestine from injury induced by lipopolysaccharide. Cell Stress and Chaperones, 2010,15:717-727.
6. Chunpeng Zhu, Wei Hu, Hao Wu, et al. No evident dose-response relationship between cellular ROS level and its cytotoxicity ― a paradoxical issue in ROS-based cancer therapy. Sci Rep. 2014, 4:5029. doi: 10.1038/srep05029.
7. Hong-Xia Li, Yu Xiao, Ling-Ling Cao, et al. Cerebroside C Increases Tolerance to Chilling Injury and Alters Lipid Composition in Wheat Roots. PLoS ONE, 2013, 8(9): e73380. doi:10.1371/journal.pone.0073380.
8. Yan Deng, Wei Wang, Pingfeng Yu, et al. Comparison of taurine, GABA, Glu, and Asp as scavengers of malondialdehyde in vitro and in vivo. Nanoscale Research Letters, 2013, 8:190.
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文献和实验蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色
蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
或重组的纯化蛋白混合物组成。在凝胶或膜上显示其位置需要染色步骤。预染标准允许在电泳过程中监测蛋白分离,也可以在随后的印迹步骤中指示转移效率。然而,它们比较昂贵且加入染料会影响蛋白迁移率。预染标准在确定分子量时可能 不够精确,并且蛋白质上附加的染料在转移时会影响它们吸附到膜上的能力。 聚丙烯酰胺浓度 凝胶中聚丙烯酰胺浓度可以是均一浓度或是梯度浓度。最常见的聚丙烯酰胺浓度为10%,最适合分离10-150KD范围内的蛋白质。若要分析未知蛋白或许要更宽的分离范围,推荐使用梯度
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