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100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 规格:
10U×5
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 01 | 02 | 03 |
| A | Anti-mouse Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| B | Anti-rabbit Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| C | Assemble buffer | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
储存条件
-85~-65℃保存,有效期1年。
使用说明
以高通量测序建库为例,在使用前,请务必仔细阅读使用说明。
- 接头制备
Primer A-1:5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3' Primer A-2:5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Primer A-3:5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer B:5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C:5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2)将Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。
3) 分别配制如下反应体系:
| 组分 | 反应1 |
| Primer B(200 μM) | 10 μL |
| Primer C(200 μM) | 10 μL |
| total | 20 μL |
| 组分 | 反应2 |
| Primer A-1 or A-2 or A-3(200 μM) | 10 μL |
| Primer C(200 μM) | 10 μL |
| total | 20 μL |
5)反应结束后,将反应1和反应2等体积混合,混匀。命名为Adapter Mix,-25~-15℃保存。
2.转座子生成
1) 配置以下反应体系:
| 组分 | 体积(μL) |
| Anti-mouse Tn5 or Anti-rabbit Tn5 | 10 |
| Adapter mix (50 μM) | 0.5 |
| Assemble Buffer | 0.5 |
注意事项
1. 转座酶对温度敏感,建议尽快完成接头包埋,生成的转座子可于-25~-15℃保存,有效期1年。
2. 本产品仅作科研用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
还可以和某些抗体的 Fab 和 F(ab’)2 段结合。 Tn5转座酶 转座酶是一大类细菌来源的蛋白,通过结合转座子序列末端并催化其转移到基因组上随机位置,实现“剪切-粘贴”或“复制-粘贴”型的 DNA 插入的作用。其中 Tn5 转座子因其转座的随机性好、稳定性高、插入位点容易测序等特点,已经成为分子遗传学及基因诊断学研究的热门工具。 Tn5 转座子是一种细菌转座子,全长约 5.8 kbp ,由编码三个抗生素(新霉素、博莱霉素、链霉素)的核心序列和两条倒置的 IS50 序列组成
Mesoplasma florum: Tn5 Transposase
Tn5 Transposase production Tn5 transposase is the key enzyme in forming transposomes for random transposon insertions. It is sold by Epicentre at ridiculously high price. Here, we make it from a plasmid provided by Prof. Wolfgang Hillen PMID
,将 CUT&RUN 技术升级到单细胞水平,并应用于早期胚胎研究。 2019 年 Henikoff 等发明 CUT&Tag ,使用带有接头的 Tn5 转座酶替代 MNase ,简化实验操作,将细胞量从 104 级别降到 60 个细胞甚至单细胞。 2.蛋白质-DNA 互作技术概述 ✦染色质免疫共沉淀(ChIP): ChIP 是全基因组范围内检测蛋白-DNA 互作的标准方法,该技术由 Orlando 等于 1997 年创立[1]。 图 1:ChIP 基本原理图[1] ✦ ChIP
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