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名称:鸡外周血NK细胞分离液供应
产地:国产|进口
编号:TH145
品牌:百奥莱博
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文献和实验流式课堂 | 裂红 or 分离液?外周血不同制备方法应用场景
外周血样本采集完毕后,我们需要对其中的待测单细胞进行提取。针对外周血样本,最常使用的样本制备方法有两种: 一. 裂红法 利用红细胞裂解液,去除红细胞 二. Ficoll 法 利用不同细胞的沉降系数差异,进行梯度密度离心,提取 PBMC 两种方法分别在什么场景下应用?接着往下看。 裂红法 裂红法,即裂解样本中的红细胞。血液中的红细胞比白细胞多 10-100 倍,红细胞数量过多,会影响细胞群体的分析。因此,我们在做血液样本检测时,经常需要裂解红细胞。 裂红前 裂红后 01
核细胞分离开来。 Ficoll密度梯度离心法是分离、纯化PBMC最常用的方法。Ficoll是蔗糖的多聚体,中性,平均分子量400000,当密度为1.2g/mL,未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜,故常用作PBMC分离的分离液。红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重,离心后漂浮于分离液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分层液液面上的白膜层细胞,并进行适当的清洗,就可从外周血中分离到较高纯度的单个核细胞,即PBMC。 2 方法 1) 取新鲜抗凝
细胞因子能力和增殖能力等可能会与未动员外周血有一定差异。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同,在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2 方法 1) 取新鲜抗凝动员外周血,按照1:1比例加入1×稀释洗涤液,将血液进行稀释(以降低血液粘稠度),轻柔混匀,备用。 2) 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液,将稀释后的血样平铺到分离液液面上方(分离液:稀释动员外周血
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