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北京诺博莱德科技有限公司
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| 肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法) |
肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞,常成群的沿着小血管和淋巴管分布,也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围,一般细胞较大,直径约为 20-30μm,呈圆形或椭圆形,胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞颗粒呈紫红色,其他呈蓝色。
产品组成:
| 编号 名称 |
D0850 2×100ml |
Storage |
| 试剂(A): Toluidine Blue O Stain | 100ml | RT避光 |
| 试剂(B): TBO 分化液 | 250ml | RT |
| 使用说明书 | 1 份 | |
1、10%中性福尔马林固定液
2、染缸
3、系列乙醇
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法) 操作步骤(仅供参考):
1、取新鲜组织立即固定于 10%中性福尔马林固定液中,常规脱水包埋。
2、切片厚度 4-5μm,常规脱蜡至水。
3、系列乙醇各 1min,自来水洗 2min。
4、入 Toluidine Blue O Stain,浸染 15~30min。
5、自来水稍洗。
6、TBO 分化液分化,直至细胞核和颗粒清晰,可在显微镜下控制。
7、自来水稍洗,滤纸吸干或吹风机吹干水分。
8、95%乙醇 1min,无水乙醇 2 次,每次 2min。
9、二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
| 肥大细胞颗粒 | 紫蓝色 |
| 背景 | 淡蓝色 |
1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、应注意组织要新鲜,取出后立即固定。
3、甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水,否则容易导致褪色。
4、分色后应快速入 95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久,否则容易导致褪色。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法) 有效期:6个月有效。
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文献和实验140 需用甘油封固,红色 C1506 4-CN染色试剂盒 - 每套 2 支试剂 套 100 蓝色,勿用酒精脱水 C1507 单组分ABTS 染色液 100ml/500ml 300/1000 用于ELISA , 405nm
、改进和体会介绍给大家。 二、步骤: 原文的步骤见zhaolsina大虾的下面回帖(热心同志,主任加分呀!),另外为什么用G250不用R250zhaolsina大虾也为大家说明了。 1、染液配制:染色液的成份(0.12% G-250, 10%(NH4)2SO4,10% H3PO4,20%甲醇) 100ml H2O+100ml H3PO4(先混匀,产热的)+100g 粉末状(NH4)2SO4(边搅拌,边加)先溶解,然后加入 1.2g G-250 再溶解(其实不能真正溶解),用水定容
[试剂及材料] 1. 斑蟊酊剂:取药用斑蟊以95%乙醇制成10%酊剂,室温下浸泡两周后使用。 2. 鸡红细胞(CRBC)悬液:取鸡血1~2ml,阿氏液抗凝(放4℃冰箱可保存2~4周)。试验前用无菌生理盐水洗3次,然后配成5%CRBC悬液。 3. Giemsa染色液 [操作方法] 1. 取1cm2 大小的滤纸片2张,蘸满斑蟊酊,置于一侧前臂皮肤上,在滤纸片上压一块稍大的塑料片,上面再敷以清洁纱布,固定; 2. 4~5h后,取下塑料片和滤纸,可见局部皮肤发红,表皮开始松动
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