T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成试剂盒

大多数真核mRNA的高效翻译需要在5’末端有一个7-甲基鸟苷帽结构、3’末端有一个Poly(A)尾。T7 ARCA加帽加尾RNA合成试剂盒可以快速的体外合成带帽带尾的mRNA。T7 RNA聚合酶通过转录，将抗-反向帽类似物（ARCA）加到mRNA上。经DNase I短暂温育可以去除模板DNA，并在Poly(A)聚合酶的作用下，为加帽的mRNA加Poly(A)尾。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义RNA及RNAi实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和RNA疫苗等。
T7 RNA聚合酶识别T7 promoter（TTCTAATACGA CTCACTATAGG）以-2位G碱基为起点开始转录，该试剂盒可以从少量样本得到高效转录，单次反应可获得>30 μg的mRNA产物，转录长度可达4000nt以上。转录产物80%以上含有7-甲基鸟苷帽结构、Poly(A)尾长度>80nt。
组份
名称    10T    50T
5×ARCA/NTP mix    40 μl    200 μl
5×T7 RNA Pol Buffer    40 μl    200 μl
T7 ARCA Enzyme Mix    40 μl    200 μl
10×EPAP Reaction Buffer    1 ml    1 ml
Poly(A) Polymerase    50 μl    250 μl
RNase Free DNase I    20 μl    100 μl
RNase Free H2O    1 ml    1 ml
储存
-20℃可保存2年，避免反复冻融。