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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
厂家直销,现货充足
- 供应商:
武汉纯度生物科技有限公司
- 检测范围:
参考说明书
- 检测方法:
ELISA酶联免疫法
- 应用:
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、猪、牛、鸡、鸭、鱼虾蟹类、兔、犬、植物等
- 标记物:
参考说明书
- 样本:
血清血浆细胞上清液组织匀浆尿液
- 规格:
48T///96T
QQ:1546342329 3176445674
试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
武汉纯度生物科技有限公司,主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、抑制剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量,正如公司名一样,达到“专业规格,纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天,质量为根,诚信为本,创新为魂”的信念,将以优质的产品,完善的服务,为每一位客户的实验保驾护航。
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文献和实验* 肿瘤标志物的联合应用推荐方案 肿瘤类型 肿瘤标志物(按检测的顺序排列,如果已确诊,括号内的项目可不检测) 肝 AFP+CEA+(AFU) 结、直肠、胆道 CEA+CA199(+CA242+CA50 ) 胰 CEA+CA199+CA242(+CA50 ) 胃 CEA+CA199+CA724 食道 CEA+
(1)癌胚抗原:癌胚抗原(CEA)常采用ELISA、放射免疫或化学发光法检测。恶性积液CEA明显增高医`学教育网搜集整理。动态检测CEA,并与血清CEA相对照,对恶性肿瘤诊断的符合率可达80%.当积液中CEA>20μg/L,积液CEA/血清CEA比值>1.0时,应高度怀疑为恶性积液,且CEA对腺癌所致的积液诊断价值最高。 (2)甲胎蛋白(AFP):常用ELISA、放射免疫或化学发光法检测AFP.血清AFP对原发性肝癌和胚胎性肿瘤的诊断价值较大。积液中AFP含量与血清浓度呈正相
年FDA通过的ELISA试剂盒,标本为尿液,血尿对检测无影响。NMP22与细胞学诊断膀胱肿瘤的敏感性的比较(G为恶性程度) (2)Survivin 为凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP),正常终末期细胞不表达,胚胎期及肿瘤细胞表达。各种肿瘤细胞都有一定的阳性率。特别是对膀胱移行上皮癌有100%的阳性率(RT-PCR),特异性>90%。现有ELISA试剂盒(尿液标本),优点同上。
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